鲫卵黄脂磷蛋白的纯化鉴定及其夹心ELISA的建立

• 作者: 张振忠 汝少国 王军 郑明驿 马淑伟
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鲫 卵黄脂磷蛋白 纯化 性质鉴定 ELISA
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 53-59
• 页数: 7页
• 分类号: X52|S917
• 字数: 3866字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2018.17034

摘要

鲫(Carassius carassius)卵黄原蛋白(vitellogenin,Vtg)是检测水体环境雌激素活性常用的生物标志物.本研究利用凝胶过滤结合离子交换层析与选择性沉淀结合离子交换层析2种方法, 从鲫卵巢匀浆液中纯化得到了卵黄脂磷蛋白(lipovitellin, Lv), 经鉴定该蛋白含有糖、磷、脂基团, 天然分子量约为521 kD, SDS变性电泳显示分子量为117 kD和103 kD的2个亚基.Western blot结果显示,金鱼(Carassius auratus)Lv抗体和斑马鱼(Danio rerio)Lv抗体都能与鲫Lv发生很好的交叉反应.利用纯化的鲫Lv与金鱼Lv抗体和斑马鱼Lv抗体建立了2种夹心ELISA, 发现金鱼 Lv 和鲫 Lv 的结合曲线基本重合, 并且利用鲫 Lv 与金鱼 Lv 抗体建立的夹心 ELISA 工作范围为15.6~1000 ng/mL, 检出限约为6.8 ng/mL, 显著低于利用斑马鱼 Lv 抗体建立的夹心 ELISA, 结合此前研究者建立的鲫Vtg竞争ELISA, 为鲫Vtg指标的测定提供了可靠方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汝少国	中国海洋大学海洋生命学院	85	802	15.0	24.0
2	王军	中国海洋大学海洋生命学院	18	100	6.0	9.0
3	张振忠	中国海洋大学海洋生命学院	3	1	1.0	1.0
4	马淑伟	中国海洋大学海洋生命学院	2	1	1.0	1.0
5	郑明驿	中国海洋大学海洋生命学院	1	1	1.0	1.0