组蛋白H3Thr3磷酸化在Sf9细胞有丝分裂中的动态定位

• 作者: 吴盼盼 唐存多 张冰 徐茜 朱露露 王姣玲 阚云超
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Sf9细胞 组蛋白H3 磷酸化 有丝分裂 免疫荧光 胞质分裂
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1247-1252
• 页数: 6页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2018.11.001

摘要

[目的]研究组蛋白H3Thr3磷酸化这一表观标记在Sf9细胞有丝分裂中的功能.[方法]通过固相法合成一段包含组蛋白H3第1-9位氨基酸的肽段[ARTKQTARKC],将第3位苏氨酸进行磷酸化修饰(P-Pep 226555)或者不修饰(NP-Pep 080472)后制备抗体,Western blot检测抗体的特异性.培养Sf9细胞,通过爬片制备细胞处于有丝分裂不同时期的玻片,以免疫荧光标记检测磷酸化H3 Thr3(H3Thr3 ph)抗体在Sf9细胞有丝分裂不同时期的定位特点.[结果]在Sf9细胞中,组蛋白H3Thr3的磷酸化发生在前期细胞染色体的特定位置;随着细胞周期的进行,磷酸化信号逐渐增强,中期达到最高水平,有丝分裂后期在形成子细胞的赤道板处均匀分布,末期仅在赤道板特定位置残留微弱的磷酸化信号.[结论]H3Thr3的磷酸化与Sf9细胞胞质有丝分裂相关.