缺氧条件下巨噬细胞移动抑制因子对肉鸡心肌脂肪酸代谢的影响

• 作者: 任昊 孙耀贵 李丽芳 李嘉威 李宏全 段智变 王彦美 王文魁 裴芳樱 黄楠
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肉鸡 心肌细胞 脂肪酸代谢 巨噬细胞移动抑制因子
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 195-202
• 页数: 8页
• 分类号: S852.2
• 字数: 4649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.01.022

摘要

旨在探讨缺氧条件下巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对肉鸡心肌脂肪酸代谢的影响.取9～12日龄鸡胚,采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化法分离培养心肌细胞,镜下观察细胞形态及活力,并对其进行免疫细胞化学鉴定.以低氧诱导因子1α(HIF-1α)为缺氧指标,化学缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理鸡胚心肌细胞,构建细胞缺氧模型.为了确认MIF与磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)的关系,在缺氧模型上用MIF抑制剂(ISO-1)阻断MIF,观测p-AMPK是否随MIF阻断而变化.利用Western bolt检测脂肪酸代谢关键酶脂肪酸转运酶(FAT/CD36)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)及肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT-1 A)是否在缺氧状态下发生变化.结果:经差速培养的鸡心肌细胞纯度达90％以上;镜下观察,细胞呈梭形和不规则形,并可自发节律性搏动,频率80～130次·min-1.Western bolt检测显示,经600 μmol·L-1 CoCl2处理心肌细胞24 h,HIF-1α表达较正常对照组极显著升高(P＜0.01);100 μmol· L-1 ISO-1阻断MIF后,MIF及p AMPK表达量均明显降低(P＜0.01).与正常组相比,缺氧组心肌MIF、p-AMPK、FAT/CD36、p-ACC和CPT 1A表达均极显著升高(P＜0.01);ISO阻断组心肌各目的蛋白质的表达较缺氧组均极显著下降(P＜0.01).缺氧条件下,心肌自分泌MIF增多,通过激活AMPK促进脂肪酸相继进入细胞质和线粒体,加强氧化供能,为缺氧提供代偿性保护.