蓝状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)高温果胶甲酯酶PmeT在毕赤酵母中的高效表达及酶学性质

• 作者: 华婷 姚斌 李雅楠 涂涛 王凯凯 罗会颖 黄火清
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 果胶 果胶甲酯酶 高温真菌 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 122-130
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20170052

摘要

[目的]在毕赤酵母中高水平表达蓝状菌(Talaromyces leycettanus JCM 12802)来源的高温果胶甲酯酶,并对其进行酶学性质研究,具有高催化效率的高温果胶甲酯酶有望能广泛应用于低甲氧基果胶的生产,优化生产工艺,提高转化率,降低生产成本.[方法]利用RT-PCR的方法,以蓝状菌(T.leycettanus JCM12802)总RNA为模板,克隆得到果胶甲酯酶基因(PmeT)的cDNA.将其插入表达载体pPIC9K,并转化毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115,高活性的阳性转化子进行高密度发酵研究.[结果]重组酵母的果胶甲酯酶表达水平达到428 U/mL,并进一步鉴定了重组果胶甲酯酶的酶学性质.该酶的最适反应温度为75℃,且在85℃以下具有较好的热稳定性.最适反应pH为4.0,在pH 2.0-7.0之间有较好的稳定性.[结论]用重组毕赤酵母可高效表达蓝状菌来源的高温果胶甲酯酶,为其今后在工业上的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
3	黄火清	中国农业科学院饲料研究所	16	100	6.0	9.0
4	涂涛	中国农业科学院饲料研究所	7	7	2.0	2.0
5	华婷	中国农业科学院饲料研究所	1	1	1.0	1.0
6	王凯凯	中国农业科学院饲料研究所	1	1	1.0	1.0