V1C、G116D、N171H定点突变对黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S木聚糖酶XynZF-2热稳定性的影响

• 作者: 何优 周晨妍 张米帅 蔡刘滕子 邵天赐 陈亚文
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 木聚糖酶 生物信息学 定点突变 热稳定性
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 249-254
• 页数: 6页
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2018.03.0043

摘要

[目的]探索V1C、G116D、N171H定点突变对木聚糖酶XynZF-2热稳定性的作用.[方法]生物信息学方法确定木聚糖酶XynZF-2可突变位点,引入Cys、Asp、His;定点突变V1C、G116D、N171H,PCR扩增突变基因xynCDH,构建大肠杆菌表达载体,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白并测定酶活,分析酶学性质.[结果]突变酶XynCDH的最适温度由40℃上升到45℃.40℃条件下突变酶XynCDH半衰期t1/240℃由55 min延长到60 min;在45℃条件下,突变酶XynCDH的半衰期t1/245℃由7min提高到15 min.[结论]定点突变V1C、G116D、N171H能增强木聚糖酶XynZF-2热稳定性,为加深木聚糖酶分子改造的研究提供参考.