耐热耐碱木聚糖酶在大肠杆菌中的高效分泌表达及酶学性质研究

• 作者: 凌沛学 刘飞 张晓元 朱希强 王羽 郝荣华 陈勉
• 来源期刊: 食品与药品
• 学科: 生物学
• 关键词: 木聚糖酶 大肠杆菌 耐碱性 耐热性 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 168-173
• 页数: 6页
• 分类号: Q556
• 字数: 4443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-979X.2018.03.002

摘要

目的 研究枯草芽孢杆菌来源的木聚糖酶基因在大肠杆菌BL2l中的高效分泌表达并对其产木聚糖酶进行酶学性质分析.方法 全基因合成枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因序列并进行密码子优化,经大肠杆菌BL2l表达后获得基因工程菌株,通过SDS-PAGE电泳检测、硫酸铵分级沉淀和AKTA系统分离纯化,分析表达产物的酶学性质.结果 重组木聚糖酶为胞外分泌性表达,相对分子质量约43×103;酶促反应最适温度为65 ℃,最适pH为10.0,最适条件下酶活最高可达1201.5 IU/ml.结论 成功获得高效分泌表达重组木聚糖酶的基因工程菌株,该木聚糖酶具较好的耐热性和耐碱性.