牙鲆原代肾细胞培养及其对牙鲆弹状病毒的易感性研究

• 作者: 唐小千 张家林 战文斌 绳秀珍 邢婧
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 牙鲆 原代细胞培养 胰酶消化法 牙鲆弹状病毒 敏感性
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 19-24
• 页数: 6页
• 分类号: S91
• 字数: 4388字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16441/j.cnki.hdxb.20170038

摘要

为探索牙鲆弹状病毒(HIRRV)对敏感宿主牙鲆肾脏原代细胞的敏感性,本研究分别采用组织块移植法和胰酶消化法对牙鲆(Paralichthys olivaceus)肾脏细胞进行分离和原代培养.研究显示,采用组织块移植法进行培养后,会出现较多的成纤维样细胞,而采用胰酶消化法进行培养后,细胞呈现上皮细胞样且形态完整,7天后细胞的汇合率可达80％.采用胰酶消化法对牙鲆肾细胞进行原代培养,传代后进行病毒敏感性实验,实验表明牙鲆肾细胞接种HIRRV后,第3天出现了明显的CPE,病毒滴度达1×105.8 TCID50/mL;RT-PCR可从感染3天的细胞培养物中检测到HIRRV的特异性mR-NA;利用抗HIRRV单克隆抗体结合免疫荧光试验可从感染24 h的细胞中检测到特异性荧光信号,信号分布在细胞膜和细胞质中.研究结果表明,基于胰酶消化法建立的牙鲆肾脏原代细胞对HIRRV较敏感,HIRRV可成功侵染该细胞并在细胞内实现快速增殖.本研究为牙鲆弹状病毒的致病机制研究提供了材料和实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐小千	中国海洋大学水产学院水产动物病害与免疫实验室	31	124	6.0	9.0
2	绳秀珍	中国海洋大学水产学院水产动物病害与免疫实验室	56	404	11.0	18.0
3	战文斌	中国海洋大学水产学院水产动物病害与免疫实验室	97	1155	20.0	30.0
4	邢婧	中国海洋大学水产学院水产动物病害与免疫实验室	46	478	11.0	20.0
5	张家林	中国海洋大学水产学院水产动物病害与免疫实验室	1	0	0.0	0.0