应用iTRAQ定量蛋白质组学技术筛选无乳链球菌鱼源株与人源株差异表达蛋白

• 作者: 刘广锦 刘永杰 朱善元 武彩红 袁橙 郭长明 陆承平
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 无乳链球菌 鱼源株 人源株 iTRAQ 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 页码范围: 442-451
• 页数: 10页
• 分类号: Q938.8|S917.1
• 字数: 6483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20170110690

摘要

以斑马鱼和巨噬细胞作为体内、外感染模型,比较无乳链球菌鱼源株GD201008-001与人源株A909的致病性差异,利用iTRAQ技术和质谱分析技术进行差异表达蛋白鉴定,以期为揭示无乳链球菌不同宿主来源株致病机制提供新思路.实验通过测定菌株GD201008-001、A909的斑马鱼半数致死量和巨噬细胞吞噬率,比较二者致病性差异;提取全菌蛋白,经iTRAQ试剂标记后进行质谱鉴定,质谱数据用软件Mascot 2.2和Proteome Discoverer 1.4进行查库(UniProt数据库)鉴定及定量分析,并对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG通路分析.结果显示,GD201008-001毒力显著高于A909;通过iTRAQ分析两株菌差异表达蛋白,发现差异蛋白涉及的生物学功能较为广泛,在鉴定出的368个差异表达蛋白中,GD201008-001中上调表达蛋白193个(比值>1.5),下调表达蛋白175个(比值<0.667).生物信息学分析预测这些蛋白主要涉及26个生物学功能,14个通路,推测ClpX、GlmS和CpsIVK可能在两株菌致病性差异中发挥重要作用.本研究为阐明无乳链球菌不同宿主来源株致病性差异奠定了基础.