胰酶消化时长对GFP转基因小鼠BMSC传代生长特性的影响

• 作者: 刘高米洋 和法莲 李自安 杨建勇 潘兴华 白盈盈 陈慧芬
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 小鼠 骨髓间充质干细胞 胰酶消化 时间
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 干细胞与再生医学
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 2819字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2018.01.009

摘要

目的 比较胰酶消化时间对绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)传代生长、分化能力的影响.方法 取含相同细胞量的P2代绿色荧光蛋白转基因小鼠BMSC悬液接种于6孔细胞培养板中,待细胞生长融合度达到80％～90％时,用0.25％的胰酶消化5、10、15和20 min,比较不同时间点胰酶的消化能力、再次贴壁生长状态、培养上清中BMSC死亡碎片的数量以及诱导成脂、成骨、成软骨分化能力.结果 消化5 mins后,大量BMSC处于贴壁状态,无法传代;消化10、15 mins后,80％以上的BMSC缩成圆形并脱落,二次贴壁后呈长梭形,表面光滑,具有多向分化潜能;消化20 min后,BMSC全部悬浮,再贴壁后呈宽大扁平状,表面粗糙,培养上清中悬浮大量细胞死亡碎片.结论 绿色荧光蛋白转基因小鼠BMSC传代培养中,0.25％胰酶的最佳消化时间为10～15 mins.