经MEGJ的cAMP传递介导Ang2调节缺氧大鼠血管平滑肌细胞低反应性

• 作者: 刘良明 徐竞 李涛 杨光明
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧 血管低反应性 血管生成素2 肌内皮缝隙连接 缝隙连接蛋白43
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 41-46
• 页数: 6页
• 分类号: R363.2+1|R364.1
• 字数: 3621字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.01.007

摘要

目的:观察肌内皮缝隙连接(MEGJ)是否通过传递环磷酸腺苷(cAMP)介导血管生成素2(Ang2)对血管平滑肌细胞(VSMCs)中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和血管低反应性的调节.方法:在双面共培养系统中培养大鼠血管内皮细胞(VECs)和VSMCs,并予以RNA干扰和缺氧等处理;采用Western blot技术检测VSMCs中iNOS的表达;通过检测FITC标记的牛血清白蛋白的荧光透过率反映VSMCs收缩反应性;采用Alexa Fluor 488-cAMP为示踪剂,观察cAMP从VECs到VSMCs的跨MEGJ转运.结果:在单独培养的VECs和VSMCs中,缺氧及Ang2处理后cAMP浓度均显著增高(P<0.05),但在VECs和VSMCs中的水平并不相同,在VECs中的水平显著高于VSMCs中的水平(P<0.05).在双面共培养系统中,VECs和VSMCs中cAMP的浓度差则明显降低,且VSMCs中增高的cAMP水平可被缝隙连接蛋白43(Cx43)小干扰RNA(siRNA)显著抑制(P<0.05).外源性Ang2作用下缺氧后荧光标记的Alexa Fluor 488-cAMP发生明显的从VECs到VSMCs的转运,且可被Cx43 siRNA显著抑制(P<0.05).在双面共培养系统的VECs和VSMCs侧给予cAMP抑制剂均可显著抑制外源性Ang2作用下缺氧VSMCs的iNOS高表达,改善VSMCs的收缩低反应性(P<0.05).结论:缺氧后Ang2可能通过Cx43,促进cAMP经MEGJ传递进入VSMCs,导致VSMCs的iNOS高表达和收缩低反应性.