不同试剂盒提取DNA对猪肉中弓形虫PCR检测的影响

• 作者: 张晓丽 张烨华 游艳敏 程龙 米荣升 贾海燕 陈兆国 韩先干 黄燕
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 弓形虫 DNA提取 PCR检测 猪肉
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 62-67
• 页数: 6页
• 分类号: S852.123
• 字数: 4197字
• 语种: 中文

摘要

弓形虫病是一种分布广泛、危害严重的人兽共患寄生虫病.为了比较不同试剂盒提取猪肉中弓形虫DNA的效率和质量及对弓形虫PCR检测的影响,本试验采用6种商品化基因组DNA提取试剂盒,对添加了不同数量弓形虫速殖子的猪膈肌样品进行DNA提取,作为模板,进行PCR检测,观察不同试剂盒提取DNA的扩增效果.结果显示,EZNA Tissue DNA Kit、TIANamp Genomic DNA Kit和FastDNA Spin Kit for Soil三种方法对含有1×101个以上数量速殖子的猪膈肌样品提取的DNA,均能被检测为阳性;TIANamp Genomic DNA Kit提取的DNA作为模板进行PCR检测,其扩增特异性良好.利用TIANamp Genomic DNA Kit对126份上海屠宰场采集的猪膈肌样品进行DNA提取,作为模板进行PCR检测,结果阳性率为3.97％(5/126),表明TIANamp Genomic DNA Kit提取猪肉中携带的弓形虫DNA具有高效、稳定、价廉的优点,适合田间猪肉中携带弓形虫的调查研究应用.