靶向沉默异黏蛋白基因对膀胱癌细胞凋亡的影响及其作用机制

• 作者: 尹合奎 袁敬东
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 干扰小RNA 膀胱癌 异黏蛋白基因 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 150-154,171
• 页数: 6页
• 分类号: R737.14
• 字数: 4201字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2018.02.016

摘要

目的 探讨siRNA干扰技术靶向沉默异黏蛋白(metadherin,MTDH)基因对膀胱癌细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 采用RT-PCR和Western blot分别检测膀胱上皮永生化SV-HUC-1细胞和人膀胱癌BIU-87细胞中MTDH mRNA及其蛋白表达;利用脂质体转染MTDH-siRNA靶向沉默MTDH基因,以RT-PCR和Western blot检测MTDH的沉默效果及B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p53和磷酸化Akt(p-Akt)的表达;流式细胞仪检测MTDH基因沉默对BIU-87细胞凋亡的影响.结果 MTDH基因在人膀胱癌BIU-87细胞中mRNA表达(0.82 ± 0.05 vs 0.25±0.03)和蛋白表达(0.42 ± 0.06 vs 0.18 ± 0.05)明显高于膀胱上皮永生化SV-HUC-1细胞(P均＜ 0.05);与NC组相比,siRNA MTDH2组细胞中MTDH2 mRNA(0.31 ± 0.03 vs 1.02 ± 0.03)和蛋白(0.29 ± 0.02 vs 0.48 ± 0.05)的表达、siRNA MTDH3组中MTDH3 mRNA(0.22 ± 0.05 vs 1.02 ± 0.03) 和蛋白(0.18 ± 0.08 vs 0.48 ± 0.05)的表达显著降低(P均 ＜ 0.05), 且siRNA MTDH3组的降低幅度大于siRNA MTDH2组;siRNA NC组及siRNA MTDH1组差异无统计学意义(P＞ 0.05);靶向沉默MTDH基因后,与NC组相比,siRNA MTDH组BIU-87细胞的凋亡率(38.86％ ± 2.52％ vs 9.95％ ± 1.26％)、p53(1.58 ± 0.07 vs 0.61 ± 0.04)及Bax蛋白(0.86 ± 0.06 vs 0.43 ± 0.03)的表达显著升高,p-Akt (0.31 ± 0.03 vs0.75 ± 0.08)和Bcl-2蛋白(0.35 ± 0.08 vs 1.26 ± 0.12)的表达显著下降,差异有统计学意义(P均＜ 0.05),NC组与siRNA NC差异无统计学意义(P＞ 0.05).结论 MTDH基因沉默可能通过上调p53、Bax和下调p-Akt、Bcl-2蛋白的表达诱导BIU-87细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁敬东		35	250	7.0	15.0
2	尹合奎		1	0	0.0	0.0