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摘要:
人工合成了大小为2 253 bp刺突蛋白的S1亚基的基因片段,构建了含有中东呼吸综合征冠状病毒刺突蛋白S1亚单位(MERS-Co V S1)编码基因的重组表达质粒Peak13CD5LS1TEVhIgGFc,转染重组质粒至HEK293E细胞后,筛选出了可稳定表达重组融合蛋白的阳性克隆细胞株,进行了刺突蛋白亚单位融合蛋白(S1-Fc)的重组表达和纯化,获得了大小约为122 kD的重组S1-Fc融合蛋白,Western blotting验证重组蛋白为目的蛋白;将重组质粒Peak13CD5LS1TEVhIgGFc、重组S1-Fc融合蛋白以及Peak13CD5LS1TEVhIgGFc联合S1-Fc融合蛋白分别接种小鼠,以纯化的重组S1-Fc融合蛋白作为抗原,利用Western blotting及ELISA分别检测了小鼠的抗S1血清滴度及特异性.结果发现,3种方法接种的小鼠中均存在特异性抗S1血清.其中,接种重组S1-Fc融合蛋白和接种S1-Fc融合蛋白联合重组质粒的小鼠在首次接种就产生高滴度抗S1血清,而只接种重组质粒的小鼠在3次接种后才产生了特异性抗S1血清.两种含重组S1-Fc融合蛋白的接种方法诱导小鼠产生的抗S1血清滴度基本一致,均显著高于仅接种重组质粒的小鼠的抗S1血清,证明短期内重组S1-Fc蛋白接种更快速高效.
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文献信息
篇名 重组中东呼吸综合征病毒刺突蛋白S1亚基及其编码DNA接种小鼠的抗血清水平研究
来源期刊 生物技术通报 学科
关键词 中东呼吸综合征冠状病毒 重组质粒 重组S1-Fc 接种 血清滴度
年,卷(期) 2018,(10) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 150-156
页数 7页 分类号
字数 5490字 语种 中文
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0273
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李荣贵 青岛大学生命科学学院 68 702 13.0 25.0
2 张倩倩 青岛大学生命科学学院 4 2 1.0 1.0
6 刘康泰 中国医学科学院基础医学研究所 1 0 0.0 0.0
7 韩宗晟 中国医学科学院基础医学研究所 1 0 0.0 0.0
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中东呼吸综合征冠状病毒
重组质粒
重组S1-Fc
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血清滴度
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