miR-15a在脓毒性休克内皮细胞模型中的表达及作用机制

• 作者: 兰清 刘成 李充沛 王斌 郑祥德 陈浩
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-15a 人类脐静脉内皮细胞 肌球蛋白轻链激酶 通透性 脓毒性休克
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 109-114
• 页数: 6页
• 分类号: R446.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20180016

摘要

目的 探究miR-15a在脓毒性休克内皮细胞模型中表达的意义及作用机制.方法 运用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测健康对照者(n=25),脓毒症患者(n=34)和脓毒性休克患者(n=26)血浆样本中miR-15a的表达水平.在人类脐静脉内皮细胞株HUVEC中转染miR-15a模拟物和miR-15a抑制物后,LPS刺激4h后,TER (transendothelial electrical resistance)法测定各组HUVEC跨内皮电阻,并计算通透性.构建荧光素酶报告载体pMIR-肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MYLK)的3'UTR,利用荧光素酶活性检测鉴定miR-15a的预测靶基因MYLK.qRT-PCR和Western blot法分别检测MYLK的mRNA和蛋白质的表达水平.结果 miR-15a在脓毒性休克患者血浆中的含量较脓毒症患者显著下降(P＜0.05).转染miR-15a模拟物能够抑制LPS作用HUVEC后细胞通透性的升高,而转染miR-15a抑制剂则能促进LPS作用HUVEC后细胞通透性的升高.转染miR-15a模拟物显著抑制荧光素酶的活性(P＜0.05),并显著下调HUVEC细胞中MYLK的mRNA(P＜0.05)和蛋白质的表达水平;相反地,转染miR-15a抑制物则显著上调了HUVEC细胞中MYLK的mRNA (P＜0.05)和蛋白质的表达水平.结论 miR-15a能够抑制LPS作用HUVEC后细胞通透性的改变,其可能的作用机制是下调了MYLK的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	兰清		1	0	0.0	0.0
2	陈浩		1	0	0.0	0.0
3	王斌		1	0	0.0	0.0
4	郑祥德		1	0	0.0	0.0
5	刘成		1	0	0.0	0.0
6	李充沛		1	0	0.0	0.0