绵羊卵巢oar-mir-150靶向调节类固醇激素合成急性调节蛋白基因的表达

• 作者: 刘若男 周荣艳 张振红 李相运 苗艳平 锡建中 魏彦辉
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 吐鲁番黑羊 类固醇激素合成急性调节蛋白基因 绵羊微小RNA-150(oar-mir-150) 发情周期
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 234-245
• 页数: 12页
• 分类号: S826.8+9|S813.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.02.006

摘要

为研究吐鲁番黑羊(Ovis aries)的繁殖调控,培育新的高繁殖力绵羊品种,本研究以吐鲁番黑羊卵泡期和黄体期显著差异表达的绵羊微小RNA150(Ovis aries microRNA150,oar-mir-150)为研究对象,利用生物信息学预测oar-mir-150的靶基因,应用qRT-PCR检测吐鲁番黑羊卵泡期和黄体期卵巢组织中oar-mir-150和类固醇激素合成急性调节蛋白基因(steroidogenic acute regulatory protein gene,STAR)的表达水平,合成野生型、突变型和缺失型STAR基因碱基序列,退火扩增后与PGL3-control载体连接,构建荧光素酶报告基因重组载体,将绵羊oar-mir-150 mimic或negative control mimic与重组载体共转到293T细胞,利用双荧光素酶活性检测实验检测荧光素酶活性.结果表明,oar-mir-150的全部靶基因有540个,其中卵泡期与黄体期差异表达的靶基因有8个,STAR基因作为卵泡期较黄体期表达显著上调的靶基因其mRNA的3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)存在oar-mir-150靶标结合位点(UUGGGAG);相对定量结果显示:卵泡期与黄体期相比,吐鲁番黑羊卵巢组织中oar-mir-150相对表达量为0.73,显著下调(P＜0.05),STAR mRNA相对表达量为1.90,显著上调(P＜0.05);成功构建野生型、突变型和缺失型荧光素酶报告基因重组载体,并以最佳转染效率和最佳转染比例进行转染;双荧光素酶活性检测结果表明oar-mir-150靶向负调控STAR的表达.研究证明了oar-mir-150与STAR间存在确切的靶向关系,且负调控STAR基因的表达,为研究微小RNA(microRNA,miRNA)在发情周期的不同阶段调控吐鲁番黑羊繁殖过程提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张振红	河北农业大学动物科技学院	73	368	11.0	16.0
2	锡建中	河北农业大学动物科技学院	44	93	5.0	7.0
3	李相运	河北农业大学动物科技学院	29	85	5.0	7.0
4	周荣艳	河北农业大学动物科技学院	105	307	9.0	11.0
5	苗艳平	河北农业大学动物科技学院	5	7	2.0	2.0
6	魏彦辉	河北农业大学动物科技学院	11	23	3.0	4.0
7	刘若男	河北农业大学动物科技学院	3	4	1.0	2.0