转基因及相关亚品系鱼腥藻的纯化

• 作者: 何培民 冯思豫 庄旻敏 施定基 朱嘉诚 栾必荣 贺婵娟 贾晓会 贾睿 顾娟
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因 蓝藻 纯化 Western Blot 抗生素筛选 RT-qPCR
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术
• 页码范围: 645-655
• 页数: 11页
• 分类号: S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.12024/jsou.20170301974

摘要

转基因蓝藻纯化是研究其生理、生化、分子生物学、营养学、药理学、毒理学等必不可少的环节,更是其作为生产原料的基础.传统纯化方法仅对不同物种间的分离进行了讨论,尚未涉及野生藻种和转基因突变株在实验和生产中相互污染情况下的鉴别和分离.本文的转基因藻纯化方法先后从种群、细胞、分子3个层面纯化分离了藻种.该方法使用平板划线的方法将杂藻杂菌与鱼腥藻分离,再使用核酸电泳、RT-qPCR、Western Blot将鱼腥藻野生种、转空载体突变株以及转目的基因突变株3个亚品系逐步分离.纯化分离后的藻株生长速率得到了提高,目的基因的表达效率增长,生产目的蛋白的产率自然增长.本研究对转基因藻在实验和生产中出现的一些问题提出了相应的解决方案,对转基因微藻的应用具有积极的作用.