大菱鲆受精卵显微注射技术的建立

• 作者: 刘新富 孟振 崔忠凯 王倩 陈松林
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 大菱鲆 受精卵 显微注射 GFP
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 30-36
• 页数: 7页
• 分类号: S962
• 字数: 4827字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20170601001

摘要

本研究将100～300 pg含有肌肉特异表达启动子和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的重组质粒(smydl∶gfp)显微注射到大菱鲆(Scophthalmus maximus)受精卵动物极细胞中,通过细心培育,成功孵化出鱼苗约120尾.统计分析显示,显微注射后,大菱鲆胚胎存活率为4.8％.利用荧光显微镜观察大菱鲆胚胎及仔鱼,只在注射smydl∶gfp质粒的胚胎及仔鱼的肌肉中发现有绿色荧光.通过进一步PCR扩增检测,在注射的大菱鲆胚胎及仔鱼DNA中扩增出了GFP特异片段,大小约为340 bp.研究表明,本研究成功建立了大菱鲆显微注射技术,可为大菱鲆基因功能研究和遗传育种奠定基础.