牵拉力对RPE细胞分泌VEGF影响的实验研究

• 作者: 刘武 刘谦 张敬学 武珅 陈金秋
• 来源期刊: 眼科
• 关键词: 血管内皮生长因子 视网膜色素上皮细胞 三维培养
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 200-205
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13281/j.cnki.issn.1004-4469.2018.03.009

摘要

目的 观察牵拉力诱导下RPE细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达及两者之间的关系.设计 实验研究.研究对象 ARPE-19细胞株.方法 应用Flexcell-5000应力加载系统牵拉3D-RPE模型.根据不同大小牵拉力分为对照组(无牵拉力组)、A组(20％形变组)、B组(10％形变组)、C组(5％形变组).各组依照不同的时间点收取样本进行检测.应用实时荧光定量PCR检测各组不同时间点(0、24、48 h)VEGFA mRNA的表达情况,蛋白印迹法检测(0、24、48 h)VEGFA-165的表达以及ELISA方法检测(0、12、24、36、48 h)细胞上清液中VEGFA的分泌.同时,为了体外定量检测细胞VEGF的促新生血管形成能力,使用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行了体外成管实验(24、48h).主要指标 VEGFA mRNA相对表达量、VEGFA-165相对表达量、细胞上清液VEGFA分泌量、HUVEC成网数.结果 与对照组比较,A、B和C组在24 h(F=7.99,P=0.009)和48 h(F=75.09,P=0.000)的VEGFA mRNA表达均显著高于对照组,且B组VEGFA mRNA相对表达量在任意时间点均高于A组和C组(P均＜0.05).受牵拉力的三组的VEGFA-165蛋白相对表达量在24 h(F=51.62,P=0.000)和48 h(F=91.69,P=0.000)明显高于对照组.其中,B组VEGFA-165蛋白相对表达量在24 h(0.794±0.045)分别是A组的1.3倍(P=0.012)和C组的1.2倍(P=0.043),且在48 h(1.192±0.042)VEGFA-165蛋白相对表达量分别是A组的1.4倍(P=0.0001)和C组的1.3倍(P=0.0001).随着时间延长,在24 h(F=131.16,P=0.0001)、36h (F=66.56,P=0.0001)和48 h(F=605.19,P=0.0001)A、B和C组细胞上清液VEGFA浓度明显高于对照组.体外成管实验中,48 h受牵拉力各组成网数均显著高于对照组(F=13.13,P=0.002),而24 h仅B组成网数有明显升高(P=0.029).结论 牵拉力可诱导RPE细胞VEGF过表达,且具有时间效应和潜在的促新生血管形成的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张敬学		12	18	2.0	4.0
2	刘谦		40	146	6.0	10.0
3	刘武		28	76	5.0	8.0
4	武珅		5	2	1.0	1.0
5	陈金秋		1	0	0.0	0.0