永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系的建立及鉴定

• 作者: 余艳玲 冯鹏霏 张永德 潘传燕 罗洪林
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 尼罗罗非鱼 巨噬细胞 永生化 细胞系
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 页码范围: 376-387
• 页数: 12页
• 分类号: S917.4
• 字数: 7731字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20170410798

摘要

为获得具有单一克隆特性的能稳定传代培养的罗非鱼巨噬细胞系,本研究从尼罗罗非鱼腹腔中分离纯化巨噬细胞,采用EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)感染,筛选单克隆细胞的方法建立了尼罗罗非鱼巨噬细胞系,并对其进行了EBV感染鉴定、电镜观察、端粒酶活性检测、致癌性评估、核型分析以及分子生物学鉴定.研究表明,EBV已整合到尼罗罗非鱼巨噬细胞中且稳定表达,经30代稳定传代,该细胞系仍维持较好的增殖状态;该细胞系表面不平滑,有明显的钝圆形突起和细长的伪足,表现为典型的巨噬细胞形态;端粒酶活性显著高于未经感染的巨噬细胞,而与HeLa细胞差异不显著,且该细胞系不具有致癌性,说明永生化细胞系构建成功.核型分析结果发现,该细胞系具有44条染色体,其核型公式为2 n=2 x=44=4 sm+17 st+1 t.PCR检测发现,该细胞系存在CD33和CD205的转录本,这些都是单核巨噬细胞的标志物,经18S rRNA检测证明该细胞系来自尼罗罗非鱼巨噬细胞.永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系已被成功建立,该细胞系为研究罗非鱼链球菌HSP70-肽疫苗的高保护率,以及罗非鱼的免疫防御机制提供了工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张永德	广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室	22	113	5.0	10.0
2	余艳玲	广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室	18	18	2.0	3.0
3	冯鹏霏	广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室	17	44	4.0	5.0
4	潘传燕	广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室	6	3	1.0	1.0
5	罗洪林	广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室	8	10	2.0	2.0