高水分、富含淀粉植物组织的扫描电镜制备技术优化

• 作者: 凌裕平 张晓敏 王莉 祁琰 陆彦 陈义芳
• 来源期刊: 植物科学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 扫描电子显微镜 高水分富含淀粉组织 临界点干燥 冷冻干燥
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 119-126
• 页数: 8页
• 分类号: Q94-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.11913/PSJ.2095-0837.2018.10119

摘要

应用常规高真空扫描电子显微镜观察生物样品必须经过脱水和干燥处理,但无论采用临界点干燥还是冷冻干燥方法,都存在样品表面不同程度失真的问题.植物高水分、富含淀粉组织样品经处理后,容易出现淀粉流失、细胞壁变形等现象,从而造成扫描图像粗糙,无法获得真实的细胞内部结构.本文通过对CO2临界点干燥、化学固定样品冷冻干燥和新鲜样品冷冻干燥3种扫描电镜样品制备技术中后期制样进行机械断裂和液氮脆断改进,优化出两种植物高水分、富含淀粉组织的扫描电镜样品制备方法:(1)样品首先进行FAA化学固定,经冷冻干燥后用液氮脆断,对断面喷金镀膜和扫描电镜观察.利用该方法所得细胞结构完整,细胞壁整齐,淀粉粒和蛋白轮廓明确,可用于分析淀粉粒和蛋白颗粒在细胞内的分布.(2)新鲜样品直接进行冷冻干燥,经液氮脆断后对断面喷金镀膜和扫描电镜观察.利用该方法所得细胞壁整齐,淀粉粒轮廓更清晰,并且无蛋白颗粒干扰,用于分析淀粉粒在细胞内的分布更加理想.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈义芳	扬州大学测试中心	24	417	12.0	20.0
2	王莉	扬州大学园艺与植物保护学院	91	720	14.0	23.0
3	陆彦	扬州大学测试中心	23	127	8.0	10.0
4	张晓敏	扬州大学测试中心	8	44	4.0	6.0
8	凌裕平	扬州大学园艺与植物保护学院	14	108	6.0	10.0
9	祁琰	扬州大学测试中心	1	3	1.0	1.0