极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis普鲁兰酶基因的异源表达与酶学性质分析

• 作者: 孙利鹏 王明道 王红阳 邢岩 邱爽 邱立友
• 来源期刊: 信阳师范学院学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 普鲁兰酶 Thermosipho melanesiensis 异源表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础理论研究
• 页码范围: 197-202
• 页数: 6页
• 分类号: Q556.2
• 字数: 4294字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0972.2018.02.006

摘要

选择来源于极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis (DSM12029) 的普鲁兰酶基因, 以购自德国菌种保藏中心的基因组为模板, 扩增出普鲁兰酶基因TM-pulA; 利用酶切酶连构建了重组质粒pET21a-TM-pulA; 转入大肠杆菌Rosetta (DE3) 菌株中诱导表达并经纯化后, 进行了水解产物分析和酶学性质测定. 结果显示: TM-pulA为Ⅰ型普鲁兰酶, 最适pH为5. 8; 最适温度是80 ℃; 70 ℃下半衰期为4. 75 h; Mn2+、Co2+、AL3+、Fe3+、SDS及EDTA对其酶活有不同程度的抑制作用; 该酶的Km、Vmax、Kcat及Kcat /Km值分别为4. 68 g·L-1、0. 0085 mmol·L-1·s-1、71. 18 s-1、15. 21 L·g-1·s-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王明道	河南农业大学农业部农业微生物酶工程重点实验室	50	626	12.0	23.0
2	邱立友	河南农业大学农业部农业微生物酶工程重点实验室	89	983	20.0	27.0
3	王红阳	河南农业大学农业部农业微生物酶工程重点实验室	3	2	1.0	1.0
4	邢岩	河南农业大学农业部农业微生物酶工程重点实验室	4	2	1.0	1.0
5	邱爽	河南农业大学农业部农业微生物酶工程重点实验室	2	0	0.0	0.0