牙鲆精氨酸酶Ⅱ基因的克隆以及 免疫应答表达分析

• 作者: 周茜 汪林庆 王磊 陈松林 马慧鑫
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牙鲆 精氨酸酶Ⅱ 迟缓爱德华氏菌 免疫表达 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 44-52
• 页数: 9页
• 分类号: S917.4
• 字数: 5058字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20170401002

摘要

本研究克隆得到牙鲆(Paralichthys olivaceus)精氨酸酶Ⅱ基因(ArginaseⅡ,Arg-Ⅱ)全长cDNA序列,并检测了Arg-Ⅱ在牙鲆免疫组织和细菌感染过程中的时空表达模式.结果显示,Arg-Ⅱ基因cDNA全长1882 bp,包含1050 bp开放阅读框,编码349个氨基酸(预测分子量为38.02 kDa,等电点为6.42).Arg-Ⅱ基因编码的氨基酸序列具有典型的精氨酸酶结构特征,推测与哺乳动物中的功能类似.系统进化分析显示,鱼类Arg-Ⅱ基因合成一簇,其中,Arg-Ⅱ基因与鲈鱼(Lates calcarifer)相关度最高(93％).实时荧光定量结果显示,Arg-Ⅱ基因在健康牙鲆的肝、脾和鳃等免疫组织中有较高表达.进一步研究发现,经迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染的牙鲆成鱼中,主要免疫组织中Arg-ⅡmRNA的表达量在细菌感染后6～12 h显著上调,随后表达量恢复正常.离体培养的牙鲆巨噬细胞经迟缓爱德华氏菌感染后,Arg-Ⅱ基因也呈显著上调模式.因此,本研究结果表明,Arg-Ⅱ基因参与牙鲆响应迟缓爱德华氏菌感染的免疫过程,揭示Arg-Ⅱ基因可能在牙鲆抗病免疫中发挥重要作用.