发光杆菌TT01中Tc毒素复合体基因簇的直接克隆

• 作者: 丁学知 夏立秋 张友明 李纯 涂强 潘登 谢芝玲 陈汉娜
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 发光杆菌 Red/ET直接克隆 Tc毒素复合蛋白 基因重组
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 36-44
• 页数: 9页
• 分类号: Q78
• 字数: 6825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2018.01.006

摘要

本研究通过NCBI数据分析得知Photorhabdus luminescens TT01基因组中表达Tc毒素蛋白复合体的基因簇包含了6个相关的 Tc 毒素基因,分别为 tcaZCB(plu0514-0515)、tccAB3(plu0805-0806)、tccAB1(plu4165-4169)、tcd(plu0960-0971)、tccC4(plu0976)和tccC7(plu4488).利用Red/ET直接克隆技术,快速获得发光杆菌TT01基因组 DNA 上的4个 Tc 毒素基因 tcaZCB(6804 bp)、tccAB3(7419 bp)、tccAB1(10954 bp)和 tcd (51406 bp)分别构建到相应的重组质粒p15A-cm-tcaZCB、p15A-cm-tccAB3、p15A-cm-tccAB1和p15A-cm-tcd上.通过PCR技术分别扩增得到tccC4基因(2891 bp)和tccC7基因(2871 bp),并进行T载体连接后,分别获得质粒pMD18-tcc4和pMD18-tcc7.本研究通过两种不同的生物技术方法成功克隆到发光杆菌TT01基因组上的Tc毒素蛋白复合体的所有相关基因,为后续的研究打下一定的基础.