钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
学术导航
任务中心
论文润色
登录
文献导航
学科分类
>
综合
工业技术
科教文艺
医药卫生
基础科学
经济财经
社会科学
农业科学
哲学政法
社会科学II
哲学与人文科学
社会科学I
经济与管理科学
工程科技I
工程科技II
医药卫生科技
信息科技
农业科技
数据库索引
>
中国科学引文数据库
工程索引(美)
日本科学技术振兴机构数据库(日)
文摘杂志(俄)
科学文摘(英)
化学文摘(美)
中国科技论文统计与引文分析数据库
中文社会科学引文索引
科学引文索引(美)
中文核心期刊
cscd
ei
jst
aj
sa
ca
cstpcd
cssci
sci
cpku
默认
篇关摘
篇名
关键词
摘要
全文
作者
作者单位
基金
分类号
搜索文章
搜索思路
钛学术文献服务平台
\
学术期刊
\
医药卫生期刊
\
null期刊
\
寄生虫病与感染性疾病期刊
\
ACT1-qPCR定量分析弓形虫内参引物的筛选与鉴定
ACT1-qPCR定量分析弓形虫内参引物的筛选与鉴定
作者:
李中原
郭海婷
陈志宝
原文服务方:
寄生虫病与感染性疾病
刚地弓形虫
ACT1
qPCR
内参引物
鉴定
摘要:
目的 运用PCR对刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH、PRU、VEG株速殖子和HFF、Vero细胞系以及SPF级昆明鼠脑组织所得DNA样品进行特异性扩增,鉴定并筛选出适合用作弓形虫实时荧光定量PCR(qPCR)分析的内参引物. 方法 体外培养并无菌收集HFF、Vero细胞系及弓形虫RH、PRU、VEG株速殖子,SPF级昆明鼠经颈椎脱臼处死无菌采集脑组织,并提取基因组DNA.合成弓形虫MIC6基因(ToxoDB:TGME49_218520)特异性引物P1/P2,经PCR扩增鉴定所得样品是否含有弓形虫DNA成分,设空白对照.依照ToxoDB数据库弓形虫ACT1基因参考序列(ToxoDB:TGME49_209030)设计引物,经NCBI Primer-BLAST比对分析后进行合成特异性引物P3/P4、P5/P6、P7/P8、P9/P10和P11/P12,预期片段大小均为121 bp.以弓形虫RHDNA为模板,采用梯度PCR优化ACT1基因内参引物的退火温度.运用已优化条件对待检DNA样品进行PCR特异性扩增和琼脂糖凝胶电泳分析,鉴定出适合用于弓形虫qPCR定量分析的内参引物. 结果 PCR扩增弓形虫RH、PRU和VEG株DNA.MIC6基因时均出现一条长度约为1050 bp的条带,且空白对照和其他样品无此条带,与预期结果一致,表明所得DNA样品可用.优化退火温度时发现,除P7/P8外其他引物均不受退火温度影响,56℃适合用于PCR或qPCR扩增ACT1基因目的片段的退火温度.以56℃为退火温度对待检DNA进行检测时发现,扩增弓形虫阳性样品时所有引物均能产生1条大小约为121 bp的条带,空白对照无此条带,与预期结果一致.此外,引物P7/P8、P9/P10扩增Vero细胞系和引物P3/P4、P5/P6、P9/P10扩增昆明鼠脑组织DNA样品时均有杂带出现,且有杂带大小约为121 bp;引物P11/P12扩增弓形虫阴性DNA样品时均无杂带出现. 结论 引物P11(5 ′-TCGGTGACGAAGCCCAAA-3′)和P12(5′-AGTTCGTTGTAGAAGGTGTGA-3′)适合分别用作弓形虫qPCR定量分析时扩增ACT1靶基因的上游和下游引物.
免费获取
收藏
引用
分享
推荐文章
环尾狐猴源弓形虫的检测与鉴定
环尾狐猴
刚地弓形虫
荧光定量PCR
PCR
弓形虫荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
弓形虫
529bp
荧光定量PCR
临床样品
奶山羊弓形虫ITS1和529bp基因序列分析
第一内转录间隔区
529 bp重复序列
奶山羊
弓形虫
序列分析
威海地区孕妇弓形虫感染情况的调查
弓形虫
妊娠
寄生虫
内容分析
文献信息
版权信息
引文网络
相关学者/机构
相关基金
期刊文献
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数
(/次)
(/年)
文献信息
篇名
ACT1-qPCR定量分析弓形虫内参引物的筛选与鉴定
来源期刊
寄生虫病与感染性疾病
学科
关键词
刚地弓形虫
ACT1
qPCR
内参引物
鉴定
年,卷(期)
2018,(4)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
375-379,387
页数
6页
分类号
R382.5
字数
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
陈志宝
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
85
335
9.0
14.0
2
郭海婷
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
5
4
1.0
1.0
4
李中原
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室
3
3
1.0
1.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
版权信息
全文
全文.pdf
引文网络
引文网络
二级参考文献
(38)
共引文献
(4)
参考文献
(22)
节点文献
引证文献
(0)
同被引文献
(0)
二级引证文献
(0)
1974(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
1994(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
1995(2)
参考文献(0)
二级参考文献(2)
1996(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1997(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
1999(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
2001(2)
参考文献(0)
二级参考文献(2)
2004(2)
参考文献(1)
二级参考文献(1)
2005(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
2007(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2008(2)
参考文献(0)
二级参考文献(2)
2009(4)
参考文献(2)
二级参考文献(2)
2010(1)
参考文献(0)
二级参考文献(1)
2011(2)
参考文献(0)
二级参考文献(2)
2012(6)
参考文献(1)
二级参考文献(5)
2013(4)
参考文献(0)
二级参考文献(4)
2014(5)
参考文献(1)
二级参考文献(4)
2015(10)
参考文献(5)
二级参考文献(5)
2016(6)
参考文献(3)
二级参考文献(3)
2017(7)
参考文献(7)
二级参考文献(0)
2018(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
刚地弓形虫
ACT1
qPCR
内参引物
鉴定
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
寄生虫病与感染性疾病
主办单位:
中华预防医学会
出版周期:
季刊
ISSN:
1672-2116
CN:
51-1636/R
开本:
16开
出版地:
邮发代号:
创刊时间:
1993-01-01
语种:
chi
出版文献量(篇)
2137
总下载数(次)
0
总被引数(次)
6419
期刊文献
相关文献
1.
环尾狐猴源弓形虫的检测与鉴定
2.
弓形虫荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
3.
奶山羊弓形虫ITS1和529bp基因序列分析
4.
威海地区孕妇弓形虫感染情况的调查
5.
丹东地区犬猫弓形虫血清学调查
6.
广东清远鹅弓形虫病血清学调查
7.
越冬红嘴鸥及栖息环境部分动物弓形虫流行情况分析
8.
东北华北地区部分猪场弓形虫血清抗体检测与分析
9.
北京地区犬猫弓形虫和新孢子虫感染的检测与分析
10.
2014-2017年北京地区犬弓形虫病流行率监测与分析
11.
IFNγ、IL1诱导人脑膜成纤维细胞IDO抗弓形虫增殖
12.
上海动物园流浪猫弓形虫感染情况调查
13.
改良凝集试验(MAT)检测动物弓形虫血清抗体
14.
环尾狐猴源弓形虫多位点基因的克隆、测序及基因分型
15.
黄梁木实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择
推荐文献
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
学术导航
任务中心
论文润色
登录
根据相关规定,获取原文需跳转至原文服务方进行注册认证身份信息
完成下面三个步骤操作后即可获取文献,阅读后请
点击下方页面【继续获取】按钮
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
原文合作方
继续获取
获取文献流程
1.访问原文合作方请等待几秒系统会自动跳转至登录页,首次访问请先注册账号,填写基本信息后,点击【注册】
2.注册后进行实名认证,实名认证成功后点击【返回】
3.检查邮箱地址是否正确,若错误或未填写请填写正确邮箱地址,点击【确认支付】完成获取,文献将在1小时内发送至您的邮箱
*若已注册过原文合作方账号的用户,可跳过上述操作,直接登录后获取原文即可
点击
【获取原文】
按钮,跳转至合作网站。
首次获取需要在合作网站
进行注册。
注册并实名认证,认证后点击
【返回】按钮。
确认邮箱信息,点击
【确认支付】
, 订单将在一小时内发送至您的邮箱。
*
若已经注册过合作网站账号,请忽略第二、三步,直接登录即可。
期刊分类
期刊(年)
期刊(期)
期刊推荐
中国医学
临床医学
五官科学
内科学
医疗保健
医药卫生总论
基础医学
外科学
大学学报
妇产科学与儿科学
特种医学
皮肤病学与性病学
神经病学与精神病学
肿瘤学
药学
预防医学与卫生学
寄生虫病与感染性疾病1999
寄生虫病与感染性疾病2000
寄生虫病与感染性疾病2001
寄生虫病与感染性疾病2002
寄生虫病与感染性疾病2003
寄生虫病与感染性疾病2004
寄生虫病与感染性疾病2005
寄生虫病与感染性疾病2006
寄生虫病与感染性疾病2007
寄生虫病与感染性疾病2008
寄生虫病与感染性疾病2017
寄生虫病与感染性疾病2018
寄生虫病与感染性疾病2019
寄生虫病与感染性疾病2020
寄生虫病与感染性疾病2018年第3期
寄生虫病与感染性疾病2018年第4期
寄生虫病与感染性疾病2018年第1期
关于我们
用户协议
隐私政策
知识产权保护
期刊导航
免费查重
论文知识
钛学术官网
按字母查找期刊:
A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
L
M
N
O
P
Q
R
S
T
U
V
W
X
Y
Z
其他
联系合作 广告推广: shenyukuan@paperpass.com
京ICP备2021016839号
营业执照
版物经营许可证:新出发 京零 字第 朝220126号