扩散序谱(DOSY)实验测定缓冲体系中蛋白质表观分子量

• 作者: 夏斌 李红卫 袁志良
• 来源期刊: 波谱学杂志
• 学科: 物理学
• 关键词: 液体核磁共振(liquid-state NMR) 表观分子量 扩散序谱(DOSY) 缓冲体系 脉冲梯度场
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 280-286
• 页数: 7页
• 分类号: O482.53
• 字数: 4281字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11938/cjmr20182625

摘要

液体核磁共振扩散序谱(DOSY)可以通过测定溶质分子的自扩散系数(Dt)来研究该分子在溶液中的表观分子量(M).Dt与测试体系和分子本身性质相关,蛋白质体系较为复杂,从而增加了蛋白质自扩散系数(Dt-protein)测定的难度.本文以3-(三甲基硅基)丙磺酸钠(DSS)为内标,以蛋白质分子与DSS自扩散系数的比值(Dr)来表征蛋白质分子在溶液中的表观分子量(Mprotein),该方法降低了缓冲体系对Mprotein的影响,使得Mprotein主要由分子本身的性质决定.在此基础上,测定了不同分子量蛋白质分子相对于DSS的Dr,拟合得到了Dr与Mprotein的相关关系:lgMprotein=*2.6488 lgDr*0.7863,相关系数(R2)为0.997.最后测定了通过大肠杆菌表达纯化得到的SARS冠状病毒主蛋白酶C端结构域(Mpro-C)分子相对于DSS的Dr,并计算出与文献结果一致的Mprotein,进一步验证了拟合公式的准确性和实用性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏斌	北京大学北京核磁共振中心	20	86	5.0	9.0
10	李红卫	北京大学北京核磁共振中心	1	2	1.0	1.0
14	袁志良	北京大学北京核磁共振中心	1	2	1.0	1.0