猪繁殖与呼吸综合征病毒和盖他病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 周峰 崔丹丹 常洪涛 杨霞 王傲杰 王川庆 王新卫 王新港 陈陆
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合症(PRRS) 盖他病毒(GETV) 双重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 动物病毒研究论著
• 页码范围: 232-238
• 页数: 7页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文

摘要

盖他病毒(Getah virus,GETV)可感染猪并引起和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)相类似的临床表现,且两者可混合感染而难以区分.我国检测PRRSV和其他诸多病毒的多重PCR文献已比比皆是,但尚无同时检测PRRSV和GETV方法的报道.为此,作者根据GenBank中公布的PRRSV和GETV全基因序列,设计了两对分别扩增PRRSV ORF7基因和GETV Cap基因片段的引物,通过反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,首次建立了可同时检测PRRSV和GETV的双重RT-PCR方法.结果显示,该方法可以同时扩增出PRRSV 633 bp和GETV 316 bp的特异性片段,而对猪瘟病毒等其他相关病毒扩增结果均为阴性.对GETV和PRRSV的cDNA最低检测量分别为2.48×10-4ng和2.50×10-5 ng.用建立的双重RT-PCR方法对河南15个地市92个猪场的136份临床疑似PRRS发病猪样品进行检测,共从58个猪场检出PRRSV单一阳性样品44份,阳性率为3 2.4％;GETV单一阳性样品7份,阳性率为5.15％;GETV和PRRSV混合感染样品8份,阳性率为5.88％.检测结果与单一RT-PCR结果吻合率达100％.该方法为GETV和PRRSV的快速检测、鉴别诊断和分子流行病学研究等提供了新的技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王川庆		198	1212	16.0	27.0
2	杨霞		151	817	16.0	24.0
3	常洪涛		83	312	10.0	13.0
4	陈陆		134	819	13.0	22.0
5	王新卫		109	292	8.0	11.0
6	崔丹丹		9	10	2.0	3.0
7	王傲杰		7	7	2.0	2.0
8	王新港		8	7	2.0	2.0
9	周峰		9	11	2.0	3.0