利用重组嗜热栖热菌尿苷-胞苷激酶生产尿苷酸

• 作者: 张顺棠 李国梁 李燕军 范晓光 贾子樊 陈宁 韩洪军 高立栋
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 尿苷酸 尿苷-胞苷激酶 嗜热栖热菌 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 字数: 4406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015644

摘要

尿苷-胞苷激酶(Uridine/cytidine kinase,UCK)作为生物体核苷酸代谢补偿途径中的重要催化剂,可以催化尿苷和胞苷磷酸化成为尿苷酸(5'-uridine monophosphate,5'-UMP)和胞苷酸(5'-cytidine monophosphate,5'-CMP).利用大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)分别成功克隆表达了来源于嗜热栖热菌(Thermus thermophilusHB8)以及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis 168)的尿苷-胞苷激酶.对比分析了不同重组尿苷-胞苷激酶的催化特性发现,来源于嗜热栖热菌的尿苷-胞苷激酶能以鸟苷三磷酸(Guanosine 5'-triphosphate,GTP)或者腺苷三磷酸(Adenosine 5'-triphosphate,ATP)作为磷酸供体催化尿苷生成尿苷酸,而来源于枯草芽孢杆菌的尿苷-胞苷激酶只有以GTP作为磷酸供体时的催化效果较好.在优化的反应条件下,使用来源于嗜热栖热菌的尿苷-胞苷激酶,6h可催化10 mmol/L的尿苷和10 mmol/L的ATP生成8.74 mmol/L尿苷酸.研究结果表明,以ATP作为磷酸供体的尿苷-胞苷激酶可作为一种新型的催化剂用于尿苷酸的研制与生产.