豆浆脂肪氧合酶测定方法的优化及酶动力学的研究

• 作者: 严文冰 夏宁 杨文君 王晓琪 石彦国 章智华 赵雪 郭爽
• 来源期刊: 大豆科学
• 关键词: 豆浆 大豆脂肪氧合酶(LOX) 酶促反应动力学 抑制剂 激活剂
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 分析加工·产业经济
• 页码范围: 769-775
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2018.05.0769

摘要

本文以前人所确定的大豆中LOX酶活力测定方法为基础,对生豆浆中LOX活力测定方法进行稳定性方面的优化,研究热处理过程、不同浓度豆浆对LOX活力的影响,并确定LOX的最大反应速率、米氏速率常数和不同金属离子抑制剂及激活剂等酶反应动力学参数,研究结果表明:待测样品稀释300倍时,LOX活力值的变化趋势较为明显,且结果稳定;对10个不同地域大豆进行制浆,在300倍稀释倍数下测定不同加热温度的豆浆发现,LOX活力在40℃时最高,当加热至80℃时完全失活,故选择对LOX测定方法进行样品稀释300倍,加热至40℃的优化处理.优化后的方法较其它已报到方法相比,能够快速、准确地测出不同豆种所制豆浆中LOX活力值,且试验结果重复性好,稳定性高.通过对LOX酶促反应动力学的研究,确定了LOX酶促反应最大反应速率Vmax=1.99 AA·min-1,R2=0.942 8,米氏速率常数Km =452.49 μmol·L-1;金属离子中,钙离子、镁离子对LOX起抑制作用,当锌离子在浓度为0.002 mol·L-1时,对LOX起抑制作用,而当锌离子浓度大于0.004 mol·L-1时,则对LOX起激活作用.