沉默DLX4基因表达可抑制前列腺癌细胞的迁移和侵袭

• 作者: 刘守磊 吕佳 祁小龙 陈善苗
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 RNA干扰 上皮-间质转化 细胞运动 细胞迁移分析
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 419-428
• 页数: 10页
• 分类号: R737.25
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2018.11.867

摘要

目的:探讨抑制DLX4 (distal-less homeobox 4)基因的表达对人前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以及其可能的作用机制.方法:分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人前列腺癌 LNCap、DU145和PC-3细胞中DLX4 mRNA和蛋白的表达水平.将 DLX4 shRNA重组慢病毒pLKO.1-puro-shDLX4感染PC-3细胞(称为 PC-3-shDLX4细胞)后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别验证DLX4的敲除效果,应用MTT法和Transwell小室法分别检测PC-3-shDLX4细胞的增殖、迁移和侵袭能力,应用蛋白质印迹法检测PC-3-shDLX4细胞中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)以及参与调控EMT的重要转录因子Snail和Twist蛋白的表达水平.结果:DLX4 mRNA和蛋白在人前列腺癌LNCap、DU145和PC-3细胞中均有较高水平的表达,PC-3细胞中DLX4 mRNA和蛋白的表达水平均高于LNCap和DU145细胞(P值均＜0.05).重组慢病毒pLKO.1-puro-shDLX4感染PC-3细胞后,PC-3细胞中DLX4基因表达被有效沉默, PC-3-shDLX4细胞中DLX4 mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(尸值均＜0.05).PC-3-shDLX4细胞的增殖能力未发生明显改变(P＞0.05),而其迁移及侵袭能力却明显下降(P值均＜0.05).PC-3-shDLX4细胞中 Vimentin蛋白的表达水平明显下调(P＜0.05),而E-cadherin蛋白的表达水平明显上调(P＜0.05);参与调控EMT的Snail和Twist蛋白表达水平在PC-3-shDLX4细胞中亦明显下调(P值均＜ 0.05).结论:DLX4在前列腺癌细胞中表达水平较高,下调DLX4表达可能通过逆转Snail和Twist介导的EMT来抑制前列腺癌PC-3细胞的迁移和侵袭.