microRNA-10a对脓毒症小鼠脾脏CD4+CD25+Treg免疫功能的影响

• 作者: 卢中秋 李海啸 洪广亮 赵光举 连洁 邱俏檬 陈隆望
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 调节性T细胞 脓毒症 microRNA-10a 叉头蛋白翼状螺旋转录因子P3 免疫功能 效应T细胞 细胞增殖 平均荧光强度
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 脓毒症
• 页码范围: 152-158
• 页数: 7页
• 字数: 5397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.02.009

摘要

目的 探讨脓毒症小鼠CD4+CD25+Treg(regulatory cell)细胞中microRNA-10a(miR-10a)表达规律及与细胞免疫功能的关系.方法 采用清洁级雄性Balb/c小鼠建立稳定的小鼠盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)模型,分别于术后1、3、5、7d处死小鼠,无菌留取脾脏,免疫磁珠法分选CD4+T细胞与CD4+CD25+T细胞(CD4+CD25+Treg).流式细胞术检测CD4+CD25+Treg胞内叉头蛋白翼状螺旋转录因子P3(Forkhead/winged helix transcription factorp3,Foxp3),CCK-8法检测脾效应T淋巴细胞增殖,实时定量PCR(Real-time PCR)检测Treg中miR-10a的基因表达水平.小鼠尾静脉注射慢病毒下调miR-10a,观察小鼠免疫功能.数据采用SPSS 19.0统计软件进行数据处理,两组样本比较采用独立样本f检验,多组均数比较采用单因素方差分析(ANOVA)和Dunnett-t检验.结果 正常组小鼠CD4+CD25+Treg细胞在CD4+T细胞中的比例为(7.34±1.2)％,造模后脓毒症小鼠脾脏CD4+CD25+Treg比例1、3、5、7d明显升高(P＜0.05).与假手术组相比,脓毒症小鼠Foxp3的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)也明显高于假手术组(P＜0.05).Real-time PCR检测CD4+CD25+Treg中miR-10a的表达.结果发现假手术组小鼠与正常组小鼠相比差异无统计学意义(P＞0.05).脓毒症小鼠Treg中miR-10a表达较假手术组升高(P＜0.05).脓毒症鼠尾静脉注射携带miR-10a抑制序列的慢病毒后,CD4+CD25+Treg/CD4+T比例明显升高(P＜0.05),且Foxp3的平均荧光强度也明显增强(P＜0.05),CD4+T细胞的增殖能力相应减弱(P＜0.05).结论 在脓毒症致病过程Treg中miR-10a表达上调,抑制miR-10a水平能够显著提高Treg的比例和促进免疫抑制功能.鉴于CD4+CD25+Treg在脓毒症免疫功能紊乱中的重要作用,miR-10a可能是脓毒症免疫调理治疗的有效靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢中秋	温州医科大学附属第一医院急诊医学中心	97	425	11.0	16.0
2	陈隆望	温州医科大学附属第一医院急诊医学中心	6	6	1.0	2.0
3	邱俏檬	温州医科大学附属第一医院急诊医学中心	17	111	7.0	10.0
4	连洁	温州医科大学附属第一医院急诊医学中心	3	5	1.0	2.0
5	李海啸	温州医科大学附属第一医院急诊医学中心	1	4	1.0	1.0
6	洪广亮	温州医科大学附属第一医院急诊医学中心	44	240	8.0	14.0