大豆愈伤原生质体的制备和培养方式探究

• 作者: 姚陆铭 张鑫 武天龙 王彪 苏彤
• 来源期刊: 大豆科学
• 关键词: 大豆 愈伤组织 原生质体 再生 正交设计
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 耕作栽培·生理生化
• 页码范围: 741-747
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2018.05.0741

摘要

具有植物细胞全能性的原生质体是探究植物遗传转化和基因功能的理想材料,为了高效率制备大豆原生质体及其稳定培养,以交大05-133大豆未成熟子叶诱导的愈伤组织为材料,采用正交设计,对纤维素酶、果胶酶和离析酶等酶解液成分进行分析,研究原生质体高效制备方法的酶解液配比,同时探讨不同酶解时间对原生质体产量的影响,以确定最佳的原生质体酶解条件;通过对比在低熔点琼脂固体液滴培养与液体培养这两种不同培养方式下细胞的增值速率,以期建立高效的愈伤原生质体再生体系.结果显示,最佳酶解液配比为:2％纤维素酶+0.1％果胶酶+1％离析酶,在该酶解液配比下酶解5h,所得到原生质体产量和活力最高,达到(3.976±0.86)×106个·g-1.用KP8培养基对原生质体进行培养,结果显示固体液滴的培养方式更适合原生质体的分裂,原生质体植板率高于液体培养,并且在25 d内分裂形成致密的细胞团.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武天龙	上海交通大学农业与生物学院	53	430	11.0	18.0
2	王彪	上海交通大学农业与生物学院	27	128	5.0	10.0
3	姚陆铭	上海交通大学农业与生物学院	10	81	4.0	9.0
4	张鑫	上海师范大学生命与环境科学学院	12	16	2.0	3.0
5	苏彤	上海交通大学农业与生物学院	2	5	1.0	2.0