三七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析

• 作者: 关瑞攀 刘迪秋 唐笔锋 崔秀明 王倩 白智伟
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 三七 PGIP 抗性 茄腐镰刀菌 功能验证
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 页码范围: 65-71
• 页数: 7页
• 分类号: S432|Q786
• 字数: 5186字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2018.02.010

摘要

多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是植物抗病防御系统的重要组成部分.在前期研究中,从三七中分离得到一个编码PGIP蛋白的基因PnPGIP,PnPGIP在转录水平响应三七根腐病菌茄腐镰刀菌的侵染.为深入分析PnPGIP的功能,构建PnPGIP的原核表达载体,转入大肠杆菌BL21 (DE3)进行大量表达,纯化获得PnPGIP的重组蛋白,并进行体外平板抑菌试验;构建PnPGIP的植物超表达载体,通过根癌农杆菌介导产生了PnPGIP转基因烟草,分析T2转基因烟草离体叶片对茄腐镰刀菌的抗性.PnPGIP原核重组蛋白对茄腐镰刀菌、胶孢炭疽菌、核盘菌和轮枝状镰刀菌的菌丝生长具有很强的抑制作用,并且随着蛋白量的增加,抑制活性也逐渐增强.qRT-PCR分析结果显示, PnPGIP在T2转基因烟草中大量表达.此外,与野生型烟草相比,转基因烟草对茄腐镰刀菌的抗性显著增强.PnPGIP是三七中参与茄腐镰刀菌防御反应的重要抗病基因.