UHPLC-MS/MS法测定大鼠不同脑区乙酰胆碱的含量

• 作者: 丁丽敏 刘荣霞 咸友艳 有雪斌 赵紫燕
• 来源期刊: 烟台大学学报（自然科学与工程版）
• 学科: 医学
• 关键词: 超高效液相色谱-串联质谱 内源性神经递质 乙酰胆碱 替代基质法
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 页码范围: 226-231
• 页数: 6页
• 分类号: R917
• 字数: 4230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13951/j.cnki.37-1213/n.2018.03.007

摘要

建立一种快速、简便、准确的液-质联用法以检测大鼠4个脑区中内源性神经递质乙酰胆碱的含量.采用Waters Acquity UPLC HSS PFP柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),以0.1％甲酸水-0.1％甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为35℃,离子源为电喷雾离子源,采用正离子多反应监测扫描方式检测.健康大鼠麻醉后,快速于冰上取脑分区,样品称重,与5倍0.1％甲酸水匀浆,再与4倍0.1％甲酸乙腈(含内标)沉淀蛋白,离心取上清进行LC-MS/MS检测.在本研究所建立的实验条件下,乙酰胆碱的方法学验证结果符合相关规定,其浓度在0.5～200 ng/mL范围内线性关系良好(r＞0.99),定量下限为0.5 ng/mL,基质效应和回收率均大于80％,日内、日间精密度均在15％范围内,可准确、精密地检测大鼠脑区中乙酰胆碱的含量.由结果可知,乙酰胆碱在纹状体中含量显著高于其他3个脑区(P≤0.01,n=10).全面检测不同脑区乙酰胆碱的含量,能够根据其脑内含量的变化解析神经相关疾病的发病机制,有利于疾病的诊断和治疗.