适用于流式细胞术的三角褐指藻核DNA染色方法

• 作者: 兰利琼 刘倩倩 卿人韦 张志霞 曹素娟 高莉
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 三角褐指藻 流式细胞术 碘化丙啶(PI) SYBR-greenⅠ 细胞核DNA染色
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1270-1274
• 页数: 5页
• 分类号: Q179.1|Q2-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.01013

摘要

为制备可用于配置有488 nm激发器的流式细胞仪检测核DNA含量的三角褐指藻细胞,取对数生长期的三角褐指藻细胞,分别采用70％乙醇、1％戊二醛、1％甲醛溶液进行细胞固定,经RNase A消化后的样品用碘化丙啶(PI)染色,用SYBR-green Ⅰ对未经RNase A消化的细胞染色,在荧光显微镜下观察细胞染色情况,用流式细胞仪检测细胞核DNA含量.结果显示:在荧光显微镜下观察到,3种不同固定液固定的细胞均表现为SYBR-green I只对藻细胞核染色,PI对于藻的细胞核与细胞质均有着色.流式结果的DNA直方图显示,SYBR-green Ⅰ染色的细胞的DNA直方图有明显的G1与G2/M峰,拟合度(RCS)在3左右,变异系数(CV)在8.6％左右.而PI染色细胞的DNA直方图表现为变异系数值偏大,拟合度较低,没有明显的G1与G2/M峰.本研究表明,SYBR-green Ⅰ一种无需对细胞进行RNase A处理,可应用于配置有488 nm激光器流式细胞仪的核酸染料,可为研究在整个细胞周期的调控机制奠定基础,同时也为其他浮游植物细胞核的染色提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卿人韦		45	376	13.0	16.0
2	兰利琼		70	580	14.0	20.0
3	刘倩倩		7	43	3.0	6.0
4	高莉		14	57	5.0	7.0
5	张志霞		4	2	1.0	1.0
6	曹素娟		3	2	1.0	1.0