一株产低温脂肪酶沙雷氏菌的鉴定、基因表达及酶学性质

• 作者: 刘元利 周敏 李彦林 程琳 陈吉祥
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 沙雷氏菌 低温脂肪酶 基因 克隆 性质 生物柴油
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 加工技术
• 页码范围: 121-129
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2018.06.016

摘要

采用罗丹明B平板法从青海污染原油筛选到一株脂肪酶高产菌株LHY-1.根据培养特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定LHY-1为沙雷氏菌.其最佳生长和产脂肪酶的碳源、氮源分别是牛肉膏和酵母粉,最适温度20℃,初始pH 7.0,在盐度9％的培养基中生长,优化培养条件后产脂肪酶可达1 326 U/mL.用特异性引物从LHY-1基因组克隆脂肪酶基因,构建表达载体pET-28a (+)/lipase,在大肠杆菌高效表达,用Ni-NTA琼脂糖亲和柱纯化的蛋白分子质量为36 ku.重组脂肪酶最适温度为30℃,在4～30℃时表现出较大酶活力,属低温脂肪酶.该酶在pH 7.0～11.0范围稳定,30℃保持1h,酶活力维持75％.Mg2+、Ca2+对酶活力有一定的促进作用.Co2+、Zn2+、SDS、PMSF、EDTA、EGTA对酶有部分抑制作用.纯化的脂肪酶能催化大豆油和乙醇酯交换反应,用于生物柴油的催化合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈吉祥	兰州理工大学石油化工学院	22	101	6.0	9.0
2	李彦林	兰州理工大学石油化工学院	9	23	3.0	4.0
3	刘元利	兰州理工大学石油化工学院	3	17	2.0	3.0
4	周敏	兰州理工大学石油化工学院	4	23	3.0	4.0
5	程琳	兰州理工大学石油化工学院	3	4	1.0	2.0