携带EphrinA1-caspase-3基因的重组腺病毒载体的构建和包装

• 作者: 卞思源 张本斯 张覃 李庄 李艳娇 杨桂 黄煜
• 来源期刊: 解剖学杂志
• 关键词: EphrinA1 caspase-3 重组腺病毒载体 构建 包装
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 382-387
• 页数: 6页
• 字数: 5169字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1633.2018.04.004

摘要

目的:构建携带ephrinA1-caspase-3基因的重组腺病毒载体,通过包装、扩增、鉴定,为后续开展目的基因靶向治疗乳腺癌研究奠定基础.方法:以pMD18T-Casp3、pMD18T-EphrinA1为模板扩增caspase-3、EphrinA1基因,以pET28a为载体,通过双酶切、连接、转化、测序鉴定,构建pET28a-EphrinA1-Casp3.然后以质粒pEC3.1(+)为载体,获得pEC3.1-EphrinA1-Casp3.采用LR体外同源重组,构建pAd-EphrinA1-Casp3,以HEK293包装和放大培养.结果:成功将PCR扩增的EphrinA1胞外端基因和人活性型caspase-3基因定向克隆入质粒pET28a,并将EphrinA1-caspase-3融合基因转移到穿梭质粒pEC3.1(+),获得pEC3.1-EphrinA1-Casp3载体;经过体外同源重组,成功构建携带EphrinA1-caspase-3基因的重组腺病毒载体pAd-EphrinA1-Casp3;并在HEK 293细胞中完成包装和扩增;获得重组腺病毒rAd-EphrinA1-Casp3.结论:利用GatewayTM技术成功构建重组腺病毒载体pAd-EphrinA1-Casp3,经HEK293细胞包装,获得重组腺病毒rAd-EphrinA1-Casp3.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张本斯	大理大学基础医学院解剖学教研室	14	24	3.0	4.0
2	李庄	大理大学附属医院胸外科	8	9	2.0	2.0
3	卞思源	大理大学基础医学院解剖学教研室	4	9	2.0	2.0
4	杨桂	大理大学附属医院胸外科	4	7	2.0	2.0
5	李艳娇	大理大学基础医学院解剖学教研室	4	5	2.0	2.0
6	黄煜	大理大学基础医学院解剖学教研室	4	5	2.0	2.0
7	张覃	大理大学附属医院胸外科	3	4	2.0	2.0