摘要:
目的 探讨补肾通络方对膝骨关节炎大鼠的膝关节软骨中基质金属蛋白酶-3/13(matrix metalloproteinase-3/13,MMP-3/13)、组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)mRNA和蛋白聚糖酶-1(aggrecanase-1即ADAMTs-4)蛋白的表达影响.方法 将42只雄性Wistar大鼠随机分为7组:正常组,模型组,西药组,成药组,补肾通络方低、中、高剂量组,向大鼠双侧后肢膝关节腔内分别注射4%木瓜蛋白酶生理盐水溶液0.2 mL,于第1、4、7天注射以建立膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型.造模成功后,分别以蒸馏水、美洛昔康水溶液、抗骨增生胶囊水溶液、补肾通络颗粒方低、中、高浓度水溶液对大鼠进行灌胃给药干预,干预过程中观察大鼠的一般状态,于灌胃给药干预4周后处死,并刮取双膝关节内胫骨平台及股骨内、外侧髁软骨组织,置于冻存管中备用,用实时定量反转录酶-聚合酶链锁反应(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction,RT-PCR)法测定软骨中MMP-3/13和TIMP-1在mRNA水平表达的变化及Western blot法测定ADAMTs-4蛋白表达情况.结果 MMP-3和MMP-13的mRNA表达情况在模型组最高(P<0.05),正常组表达最低(P<0.05),不同药物对其影响不同,其中补肾通络方的中剂量组表达水平在各给药组中最小,成药组表达含量在各给药组中最大,补肾通络方中剂量组与高剂量组相比,中剂量组表达低于高剂量组,然二者之间差异无统计学意义(P>0.05).TIMP-1的mRNA含量在模型组中最低(P<0.05),正常组中表达最多(P<0.05),在各给药组中补肾通络方高剂量组含量接近正常组,而低剂量组表达最少.软骨ADAMTs-4蛋白表达情况,模型组含量最高,正常组含量最低,各给药组之间含量不同,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 补肾通络方治疗KOA疗效明显,其作用机制可能是通过抑制MMP-3/13和ADAMTs-4的水平,增加TIMP-1的表达,减轻膝关节软骨的破坏情况,改善KOA的症状,从而达到治疗KOA的作用.