重组枯草芽孢杆菌诱导表达AiiA及酶活性鉴定

• 作者: 张淑霞 张玲华 明飞平 曾敏 李姣清 梁倩怡 蔡海明 贾军皓 赵培静 邓锦波 马苗鹏
• 来源期刊: 生物技术
• 关键词: 群体感应 AHLs信号分子 aiiA基因 Pspac启动子 桥式PCR 枯草芽孢杆菌
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 531-536
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2018.06.0092

摘要

[目的]由于AiiA(Autoinducer inactivation,AiiA)蛋白能有效降解AHLs(N-acyl-homoserine,AHLs),导致病原菌由于群体淬灭(Quornm quenching,QQ)失去生存优势而抑制其致病能力;利用强启动子构建能高效表达AiiA蛋白的枯草芽孢杆菌,检验枯草芽孢杆菌中Pspac启动子表达AiiA蛋白的能力,寻求有效生物防治手段防治病原菌侵害.[方法]通过已知的aiiA基因序列和启动子Pspac序列设计引物,经搭桥PCR搭连启动子Pspac和aiiA基因,构建重组表达载体Pspac-aiiA-PHY300PLK,经酶活反应确定重组菌活性.[结果]成功克隆并搭连Pspac启动子和aiiA基因,AiiA蛋白成功在重组枯草芽孢杆菌C11中表达.经酶活检验,野生菌株和重组菌株Pspac-aiiA-C11有降解信号分子AHLs的能力,但重组菌降解能力更强.[结论]重组菌Pspac-aiiA-C11较野生菌株有更强的降解AHLs效力;要利用工程菌进行生物防治还需进一步提高工程菌表达AiiA蛋白的能力及稳定性.