HaV01 Pol内部半胱氨酸对其剪接活性的影响

• 作者: 孟清 李佳
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 半胱氨酸 蛋白剪接 定点突变
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 13-17
• 页数: 5页
• 分类号: Q816
• 字数: 3109字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2018.05.013

摘要

希望获得一个内部不含有半胱氨酸的蛋白质内含子作为标记和修饰的工具.通过定点突变和搭桥PCR技术对HaV01 Pol内部4个半胱氨酸Cys进行突变和替换,然后通过Western Blot检测对应的蛋白质内含子活性.结果发现,位于112位的半胱氨酸突变可以影响HaV01 Pol的剪接活性,其余3个对其剪接活性则没有任何影响,用甘氨酸Gly和苏氨酸Thr替换112Cys后,可以挽救HaV01 Pol的剪接活性.第一次发现一个非保守区的半胱氨酸可以决定蛋白质内含子的活性.通过Gly和Thr替换成功获得了2个没有半胱氨酸的HaV01 Pol蛋白质内含子,为HaV01 Pol进一步改造和应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟清	东华大学生物科学与技术研究所	43	52	5.0	6.0
2	李佳	东华大学生物科学与技术研究所	8	16	2.0	3.0