理性设计提高华根霉脂肪酶对不饱和长链脂肪酸的底物特异性及其在大豆油水解中的应用

• 作者: 喻晓蔚 徐岩 江传欢
• 来源期刊: 中国油脂
• 关键词: 脂肪酶 脂肪酸 理性设计 底物特异性 大豆油水解
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 121-128
• 页数: 8页
• 分类号: Q556|TQ645.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-7969.2018.10.025

摘要

为了提高华根霉脂肪酶在大豆油水解制备脂肪酸中的应用效果,通过理性设计的方法改造脂肪酶的脂肪酸特异性.对突变酶的酶学性质进行了研究,并通过单因素实验优化脂肪酶催化水解大豆油的反应条件.结果表明:利用定点突变技术获得了一系列脂肪酸特异性改变的脂肪酶,其中突变酶HQL增强了对不饱和长链脂肪酸的特异性,并且对p-NPP(C16)的水解活力相比野生型提高了2.72倍;所有突变酶的最适温度和最适pH均为40℃和8.0,与野生型脂肪酶一致;得到脂肪酶催化水解大豆油的最适反应条件为反应时间24h、水油质量比1∶1、加酶量500 u/g(以油质量计)、pH 8.0、温度40℃,在最适反应条件下,野生型酶催化大豆油水解率仅为80％,而突变酶HQL由于增强了对长链不饱和脂肪酸的底物特异性,对大豆油水解率提高到98％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐岩	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	233	3264	31.0	46.0
2	喻晓蔚	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	24	113	6.0	9.0
3	江传欢	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	1	1.0	1.0