TLR3/NF-κB信号通路在百草枯致急性肺损伤的研究

• 作者: 吕梦倩 孙昊 宋扬 张劲松 张峰 王军 臧松松 蒋云飞
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 百草枯 急性肺损伤 Toll样受体3 TLR诱导核转录因子 信号通路 炎性因子 动物模型 A549细胞
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 631-637
• 页数: 7页
• 字数: 4726字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.06.013

摘要

目的 观察Toll样受体3 ( Toll-like receptor-3,TLR3 )、TLR诱导核转录因子(nuclear factor-κappaB, NF-κ B)及下游炎性因子肿瘤坏死因子α (TNF-α )、白细胞介素-1 β (IL-1β )、白细胞介素-6 (IL-6)的改变,从TLR3/NF-κB信号通路探讨百草枯(paraquat, PQ )致急性肺损伤的发病机制.方法 利用PQ暴露构建小鼠的急性肺损伤模型和拟Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)的急性损伤模型;观察小鼠肺组织病理改变,进行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及细胞分类,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测炎性因子,阐述PQ对小鼠肺组织的损伤作用;利用CCK8检测细胞存活率,观察PQ致A549细胞损伤;并通过Real-time PCR和Western-blotting观察小鼠肺组织和A549细胞的TLR3、Phospho-NF-κ Bp65及下游炎性因子 TNF-α、IL-1 β、IL-6的mRNA和蛋白水平表达变化.结果 与对照组小鼠相比,PQ组存在小鼠呼吸困难,活动能力下降,进食减少,体质量下降等症状.与对照组比较,PQ组BALF细胞总数明显升高[NS:(0.018 8±0.102 1) × 105 vs. PQ: ( 0.237 4 ± 0.121 7 ) × 105,t=9.804, P＜0.01], 伴有巨噬细胞[NS: ( 0.162 8 ± 0.086 53 ) × 105 vs. PQ:( 1.063 3 ±0.343 3 ) × 105,t=8.043,P＜0.01],淋巴细胞[NS: (0.006 6 ± 0.005 2 ) × 105 vs. PQ:(0.171 2 ± 0.099 1 ) × 105,t=5.243,P＜0.01]和中性粒细胞[NS: ( 0.000 04 ± 0.000 1 ) × 105 vs. PQ: (0.901 9 ±0.652 5 ) × 105,t=4.370, P＜0.01]显著升高.PQ组小鼠肺组织充血水肿明显,病理HE染色见炎性细胞浸润和肺间质充血.ELISA结果表明,与对照组相比,PQ组支气管肺泡灌洗液的TNF-α、IL-1 β、IL-6表达均明显上升[TNF-α : t=3.030,P＜0.05, NS: (2.782 1± 3.521 5 ) vS. PQ: ( 7.512 6 ± 3.459 8 ) pg/mL;IL-1 β : t=5.391, P＜0.01, NS: (22.687 5±14.229 3 ) vs. PQ: ( 163.100 4 ± 81.118 3 ) pg/mL ; IL-6: t=4.841,P＜0.01,NS: ( 1.653 3±0.442 7 ) vs. PQ: ( 648.565 6±422.606 1 ) pg/mL].细胞实验中, CCK8结果示在剂量200～400 μmol/L PQ处理24 h后,A549细胞存活率与对照组相比较分别下降了25.3％和36.4％ (均P＜0.05 ).Real-time PCR结果提示,PQ组小鼠肺组织和A549细胞TLR3、TNF-α、 IL-1β、IL-6在mRNA水平表达均高于对照组(均P＜0.05).Western-blotting结果发现PQ组的小鼠肺组织和A549细胞的TLR3、Phospho-NF-κ Bp65蛋白水平表达明显高于对照组(均P＜0.05 ).结论 PQ可能通过TLR3/NF-κ B信号通路上调炎性因子TNF-α、IL-1 β、IL-6的表达而诱导加重急性肺损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张峰	南京医科大学第一附属医院急诊医学科	140	658	12.0	16.0
2	张劲松	南京医科大学第一附属医院急诊医学科	126	781	14.0	20.0
3	孙昊	南京医科大学第一附属医院急诊医学科	20	75	4.0	8.0
4	蒋云飞	南京医科大学第一附属医院急诊医学科	1	3	1.0	1.0
5	吕梦倩	南京医科大学公共卫生学院	2	3	1.0	1.0
6	宋扬	南京医科大学公共卫生学院	2	3	1.0	1.0
7	臧松松	南京医科大学公共卫生学院	1	3	1.0	1.0