‘蜂蜜罐’枣遗传转化条件的优化及Bt基因的导入

• 作者: 冯建灿 叶霞 张梦洋 张燕征 李继东 王腾飞 谭彬 郑先波
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: '蜂蜜罐'枣 上胚轴 子叶 gus瞬时表达率 Bt基因
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 园艺科学
• 页码范围: 43-49
• 页数: 7页
• 分类号: S665.1
• 字数: 5282字
• 语种: 中文

摘要

为建立‘蜂蜜罐’枣高效遗传转化体系,以‘蜂蜜罐’枣胚培苗上胚轴和子叶为外植体进行转化,研究了不同菌液浓度、侵染时间、共培养时间、AS(乙酰丁香酮)浓度和侵染方式对gus(β-葡糖醛酸糖苷酶)基因瞬时表达率的影响.结果表明,当菌液OD600值为0.5,真空辅助侵染10 min,共培养3 d,上胚轴和子叶外植体的共培养培养基中分别添加20和10 mg·L-1乙酰丁香酮时,其gus瞬时表达率均最高,为最佳遗传转化体系.利用已优化的遗传转化体系进行Bt基因转化,共获得24个PCR(聚合酶链式反应)检测呈阳性的再生芽;对PCR检测呈阳性的不定芽进行伸长培养和不定根诱导,最终获得完整转基因植株.本研究初步获得了转Bt(苏云金芽孢杆菌)基因的枣植株,为通过转基因手段进行枣抗虫新种质选育提供可能.