抗CD20抗体高产细胞株的筛选及质量评估

• 作者: 徐寒梅 李剑 李文蕾 纪海姣 黄瑞晶
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 单克隆 培养基优化 质量评估
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 34-40
• 页数: 7页
• 分类号: Q813
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20180805

摘要

目的:筛选高表达单克隆细胞株,并通过优化培养基及流加物,最终达到提高目的蛋白产量及质量的目的.方法:通过有限稀释法对转染目的蛋白的CHO-S细胞进行单克隆化,应用双抗夹心ELISA方法对单克隆细胞株抗体表达量进行初步评估,最后根据筛选细胞株的活率、密度、产量及代谢情况,选择2～3株单克隆细胞进行培养条件优化,并对获得的发酵液进行纯化捕获,根据抗体蛋白表达量、糖型、等电点、纯度、酸碱峰分布等进行相应的评估分析,筛选出最优细胞株及最优培养方案.结果:经过单克隆化处理以及培养条件优化,蛋白的表达量由初始的不到500mg/L提升到2 290mg/L,且抗体蛋白纯度高达97.48％.抗体蛋白质量分析结果显示B1方案为该实验最优培养方案.结论:通过细胞株筛选、培养基优化能显著提高抗体蛋白的产量及质量,同时对抗体蛋白糖型、等电点、纯度等均有一定程度的优化.因此工业生产中可以通过高表达克隆的筛选、培养工艺优化等对目的蛋白产量及质量进行一定程度的改善与提高,对后期实验研究及工业化方案开发都具有很好的指导意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐寒梅		77	186	7.0	11.0
2	李剑		2	1	1.0	1.0
3	纪海姣		1	0	0.0	0.0
4	李文蕾		1	0	0.0	0.0
5	黄瑞晶		1	0	0.0	0.0