Kruppel样转录因子2对人肝窦内皮细胞体外迁移的影响

• 作者: 刘楚 周继 曾于珍 曾晓清 李娜 潘独伊 罗添成 陈世耀
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: Kruppel样转录因子类 内皮细胞 细胞迁移 Src族激酶类 丝裂原活化蛋白激酶类
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 527-532
• 页数: 6页
• 字数: 4447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2018.07.009

摘要

目的 探索Kruppel样转录因子2(KLF2)对肝窦内皮细胞(LSEC)体外迁移的影响及其机制.方法 采用慢病毒感染的方式构建过表达和干扰KLF2表达的LSEC(分别为LV5-KLF2和LV3-shKLF2),采用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测病毒感染效率,未处理LSEC作为野生对照(WT)组.采用Transwell实验检测KLF2表达的改变对LSEC迁移能力的影响,荧光定量PCR和蛋白印迹法检测促迁移因子血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的表达,蛋白印迹法检测迁移相关信号通路蛋白Src,P38 MAPK,P44/42 MAPK的表达.结果 Transwell实验计数12 h细胞迁移数,过表达KLF2可抑制LSEC的体外迁移能力,LV5-KLF2组LSEC细胞迁移数目较LV5-NC和WT组少[(35.6±1.4)、(71.3±2.4)和(69.3±1.6)],差异均有统计学意义(均P ＜0.001).而下调KLF2表达后,LV3-shKLF2组LSEC的细胞迁移能力较LV5-NC和WT组增强,细胞迁移数目较对照组多[(189.5±5.4)、(83.4±2.5)和(82.2±3.4)],差异均有统计学意义(均P＜0.001).荧光定量PCR和蛋白印迹法证实过表达KLF2可抑制LSEC中促迁移因子VEGFR2的mRNA和蛋白水平的表达,而干扰KLF2则上调VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平.蛋白印迹结果提示过表达KLF2,抑制LSEC中信号通路蛋白p-Src、p-P38 MAPK及p-P44/42的表达,而干扰KLF2则促进LSEC中上述磷酸化蛋白的表达.结论 KLF2可能通过Src/MAPK通路抑制LSEC的体外迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈世耀	复旦大学附属中山医院消化科	158	889	15.0	21.0
2	李娜	复旦大学附属中山医院消化科	56	360	11.0	17.0
3	罗添成	复旦大学附属中山医院消化科	8	42	2.0	6.0
4	刘楚	复旦大学附属中山医院消化科	4	7	2.0	2.0
5	潘独伊	复旦大学附属中山医院消化科	6	9	2.0	2.0
6	曾于珍	复旦大学附属中山医院消化科	7	33	3.0	5.0
7	周继	复旦大学附属中山医院消化科	3	2	1.0	1.0
8	曾晓清	复旦大学附属中山医院消化科	16	71	5.0	8.0