miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中的表达及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

• 作者: 李娜 王永晶
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA194 增殖 凋亡 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1033-1036
• 页数: 4页
• 分类号: R773.9
• 字数: 3753字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中的表达及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响.方法 RT-PCR检测miR-194在正常视网膜上皮细胞系ARPE-19及葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431中的表达.取SP6.5、M23及OM431细胞分成两组,miR-194过表达组(miR-194组)及阴性对照组(NC组),经LipofectamineTM 2000分别转染miR-194 mimic及阴性对照序列scramble.CCK-8实验及流式细胞仪分别测定细胞增殖和凋亡能力,细胞划痕及Transwell实验分别测定细胞迁移和侵袭能力.Western blot测定叉头盒蛋白A1(forkhead box,FOXOA1)、多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白表达.结果 正常视网膜上皮细胞系ARPE-19中miR-194的相对表达量为1.03±0.04,葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431相对表达量分别为0.25±0.02、0.37±0.02及0.47±0.03,葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431中miR-194相对表达量低于正常视网膜上皮细胞系ARPE-19(均为P＜0.001).转染0h、24h、48 h、72 h、96h后,miR-194组和NC组A值分别为:0.23±0.02、0.21±0.03(t=0.960,P=0.391),0.38±0.02、0.37±0.03(t =0.480,P=0.656),0.75±0.04、0.78±0.06(t=-0.720,P =0.511),0.87±0.09、1.59±0.12(t=-8.313,P=0.001),1.53±0.14、3.05±0.22(t=-10.096,P=0.000);流式细胞仪检测结果显示:miR-194组细胞凋亡率为23.30％±2.10％,NC组为2.47％±0.30％,miR-194组细胞凋亡率高于NC组(t=17.007,P=0.000).细胞划痕实验结果显示:miR-194组细胞划痕愈合率为25.3％±3.5％,NC组为72.9％±6.4％,miR-194组细胞划痕愈合率低于NC组(t=-11.302,P=0.000);Transwell实验结果显示:200倍视野下,miR-194组侵袭细胞数为(188.6±20.7)个,NC组为(352.9±32.8)个,miR-194组侵袭细胞数少于NC组(t=-7.337,P=0.001).miR-194组FOX A1蛋白相对表达量为0.29±0.03,NC组为1.03±0.06,miR-194组FOX A1蛋白相对表达量低于NC组(t=-19.106,P=0.000);miR-194组裂解型PARP蛋白相对表达量为2.87±0.24,NC组为1.03±0.06,miR-194组裂解型PARP蛋白相对表达量高于NC组(t=12.882,P=0.000).结论 miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中低表达,上调miR-194表达可抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖,促进凋亡,抑制迁移和侵袭,其机制可能与下调FOX A1及上调裂解型PARP蛋白表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娜	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院眼科	78	361	9.0	15.0
2	王永晶	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院眼科	2	4	1.0	2.0