荔枝蒂蛀虫信息素结合蛋白基因序列及表达分析

• 作者: 刘艳萍 孙海滨 彭刚 李鹏燕 柏建山 王思威 龚雪海
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 荔枝蒂蛀虫 信息素结合蛋白 基因克隆 序列分析 软件模拟 表达谱
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 527-536
• 页数: 10页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2018.05.002

摘要

[目的]获得荔枝蒂蛀虫Conopomorpha sinensis3个信息素结合蛋白(PBP)基因的全长序列,并分析序列和表达特征,为更好地利用性信息素防治该虫提供必要的基础.[方法]提取荔枝蒂蛀虫触角总RNA,利用转录组测序结果和RACE-PCR技术获得3个PBP基因的全长序列;对序列进行生物信息学分析,用I-TASSER在线软件建立蛋白三维模型,用TM-align软件进行同源建模,用COACH软件推测蛋白的结合位点;用荧光定量PCR方法分析这3个基因在不同龄期(幼虫和蛹)和3日龄雌雄成虫不同组织[触角、头(去除触角)、胸、腹、足和翅]中的表达谱.[结果]从荔枝蒂蛀虫触角中克隆了3个PBP基因的全长序列,分别命名为CsinPBP1,CsinPBP2和CsinPBP3(GenBank登录号:MF093145,MF093146和MF093147).序列分析结果表明,这3个基因的编码蛋白具有昆虫气味结合蛋白的典型特征,并且CsinPBP1与紫色卷蛾Yponomeuta cagnagellus PBP的氨基酸序列一致性达72％,CsinPBP2与小菜蛾Plutella xylostella PBP1的氨基酸序列一致性达55％,CsinPBP3与水稻大螟Sesamia inferens PBP3的氨基酸序列一致性达39％.软件模拟分析表明,CsinPBP1,CsinPBP2和CsinPBP3蛋白的三维结构分别与家蚕Bombyxmon普通气味结合蛋白2(GOBP2)(PDB:2wc6A)、脐橙螟Amyetois transitetella PBP1(PDB:4inxA)和家蚕PBP(PDB∶2p70A)相似度最高,分别预测得到10,7和8个结合位点.表达谱分析显示,3个基因均只在成虫触角中表达,在幼虫期和蛹期不表达,在成虫头(去除触角)、胸、腹、足和翅中也不表达,且在雄虫触角中的表达量分别是雌虫中表达量的1.94,28.19和32.94倍.[结论]获得荔枝蒂蛀虫3个PBP基因的全长序列,序列和表达分析结果提示这3个基因与雄虫感受性信息素有关.