利用报告基因的人7型腺病毒中和抗体检测方法的建立

• 作者: 侯利华 吴诗坡 李建华 王步森 王玉东 赵拯浩
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 人7型腺病毒 萤光素酶报告基因 中和抗体 血清流行病学调查
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 770-777
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 4388字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2018.06.009

摘要

目的:构建表达萤光素酶报告基因的重组人7型腺病毒(HAdV7)Ad7-dE1-dE3-Luc(Ad7-Luc)病毒,用于检测人群中HAdV7的中和抗体水平.方法:利用同源重组方法构建E1区和E3区部分缺失,并在E1区嵌入萤光素酶基因表达框的pAd7-Luc重组质粒,转染HEK-293细胞,包装出能够表达萤火虫萤光素酶的Ad7载体重组病毒(Ad7-Luc);选取HAdV7阳性血清样本对新建立的报告基因检测方法的准确性和稳定性进行验证;最后,利用该方法对北京地区60份血清样本进行HAdV7中和抗体检测.结果:获得能够表达萤火虫萤光素酶的Ad7-Luc重组病毒,病毒滴度可达4.85×108 IFU/mL,Ad7-Luc检测法与传统细胞病变效应(CPE)法具有很好的一致性(R2=0.8612,P<0.0001),批内和批间差异分别在10％和20％以内.北京地区60例血清样本的检测结果显示,HAdV7血清阳性率约为60％(36/60),明显低于HAdV5血清阳性率75％(45/60),75％的HAdV7阳性血清中和抗体滴度集中于低滴度水平(12～200).结论:与传统的细胞病变方法相比,HAdV7中和抗体报告基因检测方法更快速、灵敏、准确,适用于人群中HAdV7血清流行病学调查及其疫苗的中和抗体研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴诗坡	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	4	1	1.0	1.0
2	侯利华	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	5	3	1.0	1.0
3	赵拯浩	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	3	1	1.0	1.0
4	王步森	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	3	1	1.0	1.0
5	王玉东	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	3	1	1.0	1.0
6	李建华	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	1	1	1.0	1.0