人卵丘颗粒细胞和壁层颗粒细胞体外培养方法比较

• 作者: 何文 吕杰 文艳飞 李涛 蔡柳洪 韩婵林
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人卵丘颗粒细胞 人壁层颗粒细胞 细胞分离 体外培养 卵泡刺激素受体
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 380-384
• 页数: 5页
• 分类号: R363|R711
• 字数: 4134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.02.031

摘要

目的:建立有效分离、提纯及培养人卵丘颗粒细胞的方法,并与人壁层颗粒细胞的体外培养相比较.方法:收集卵胞浆内单精子显微注射取卵时的卵泡液和直接机械分离卵母细胞所得的卵丘颗粒细胞复合物,直接将卵丘颗粒细胞复合物接种于培养皿中培养.用密度梯度离心法分离卵泡液中的人壁层颗粒细胞.用免疫荧光法检测卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)的表达;用CCK-8法检测细胞生长曲线;用ELISA检测这2种颗粒细胞分泌雌激素的能力.结果:直接法所得人卵丘颗粒细胞培养24 h后可贴壁,体外培养生长状态与人壁层颗粒细胞相似;免疫荧光检测显示两者均表达FSHR;CCK-8实验结果表明,两者体外培养生长曲线相似;ELISA结果显示两者分泌雌激素能力相当.结论:利用机械切割获得人卵子周围卵丘颗粒细胞复合物直接培养的方法操作简单,获得的人卵丘颗粒细胞具有与人壁层颗粒细胞相似的生长状态、生长曲线以及雌激素分泌能力,可作为人颗粒细胞亚群体外培养方法的补充.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何文	中山大学附属第三医院生殖中心	25	73	5.0	7.0
2	李涛	中山大学附属第三医院生殖中心	70	485	9.0	20.0
3	蔡柳洪	中山大学附属第三医院生殖中心	46	107	5.0	7.0
4	吕杰	中山大学附属第三医院生殖中心	9	7	2.0	2.0
5	文艳飞	江门市中心医院中山大学附属江门医院生殖中心	2	2	1.0	1.0
6	韩婵林	中山大学附属第三医院生殖中心	1	2	1.0	1.0