人突变Lumican转基因小鼠角膜组织中小分子亮氨酸蛋白聚糖成员表达改变的研究

• 作者: 宋彦铮 张丰菊 来凌波
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 关键词: 光蛋白聚糖 小鼠,转基因 角膜 富含亮氨酸小蛋白聚糖类 胶原
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 911-917
• 页数: 7页
• 字数: 5730字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4081.2018.12.008

摘要

目的 探讨人突变Lumican转基因小鼠角膜组织中小分子亮氨酸蛋白聚糖(SLRP)成员mRNA水平表达变化.方法 实验研究.选取10只(雌雄各5只)人突变Lumican转基因小鼠作为实验组,选取10只(雌雄各5只)同周龄野生型C57BL/6J小鼠作为对照组.转基因小鼠Lumican基因突变位点为cDNA 569T>C,使第199位氨基酸由亮氨酸突变为脯氨酸(L99P).8周龄时脱颈法处死入组小鼠,摘取双侧眼球后获得双眼角膜组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-Q-PCR)技术分别检测两组小鼠角膜组织中Lumican、Decorin、Biglycan、Keratocan、Fibromodulin基因在mRNA水平的表达.采用两独立样本均数t检验对两组小鼠基因表达差异进行统计学分析,差异以倍数变化法表示.结果 实验组转基因小鼠角膜组织中Lumican基因mRNA表达升高,是对照组野生型小鼠的1.497倍,差异具有统计学意义(t=4.34,P<0.05).实验组小鼠角膜组织中Keratocan基因mRNA表达降低,是对照组的0.323倍,差异具有统计学意义(t=-95.94,P<0.05).实验组中Decorin基因mRNA表达降低,是对照组的0.648倍,差异均具有统计学意义(t=-9.98,P<0.05).实验组较对照组Biglycan基因mRNA表达降低,是对照组的0.522倍(t=-7.74,P<0.05),Fibromodulin基因mRNA表达升高,是对照组的1.193倍,差异无统计学意义(t=1.66,P>0.05).结论 人突变Lumican转基因小鼠与野生小鼠相比,角膜组织中SLRP成员mRNA水平表达发生改变,提示Lumican基因突变(cDNA 569T>C)可能导致该基因结构破坏,调控角膜组织中其他SLRP成员基因表达的功能受损.此外,该基因位点的突变导致Lumican核心蛋白中第199位氨基酸由亮氨酸突变为脯氨酸(L199P),提示Lumican基因突变可能阻碍了Lumican与胶原蛋白分子结合,进而影响了SLRP成员的表达.