大鼠骨骼肌卫星细胞诱导分化为胰岛素生成细胞的研究

• 作者: 任宇 刘晓玲 梁红宇 楠吉桑漠
• 来源期刊: 中华细胞与干细胞杂志（电子版）
• 关键词: 骨骼肌卫星细胞 胰岛素生成细胞 诱导分化 功能
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-167
• 页数: 7页
• 字数: 5083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2018.03.007

摘要

目的 探讨大鼠骨骼肌卫星细胞(MDSCs)定向诱导分化为胰岛素生成细胞(IPCs),为1型糖尿病的干细胞治疗提供一种新的研究思路.方法 通过二次酶消化法和差速贴壁培养法分离、培养大鼠MDSCs,利用不同的诱导培养液使MDSCs定向分化为IPCs,并对诱导后细胞进行形态观察,通过双硫腙染色和免疫组化染色对MDSCs-IPCs形态进行鉴定,采用Q-PCR和Western Blot方法检测MDSCs-IPCs中C-peptide和Insulin的表达,通过胰岛素释放实验检测MDSCs-IPCs的生物学功能,β细胞和MDSCs-IPCs两组间比较采用t检验.结果 MDSCs 在接种4 h后开始贴壁部分细胞伸出小的突起,48 h后绝大多数细胞贴壁呈梭形、胞浆丰富、折光度高.随着培养时间的延长,细胞的梭形形状更为明显且生长迅速.免疫组化结果显示细胞表达Desmin、α-Sarcomeric Actinin、MyoD1、Myf5和PAX7.成胰诱导后MDSCs形成胰岛样的圆形细胞团,双硫腙染色呈猩红色,Insulin免疫组化染色阳性.Q-PCR结果显示MDSCs-IPCs中C-peptide和Insulin mRNA表达量分别是β细胞的0.73倍(P > 0.05)和0.79倍(P > 0.05).胰岛素释放实验显示,5.6 mmol/L和16.7 nmlol/L葡萄糖刺激培养2 h后,β细胞和MDSCs-IPCs分泌胰岛素量分别为[(20.3±4.2)mU/L]、[(16.1±3.7)mU/L]、[(60.5±9.3)mU/L]和[(40.9±7.3)mU/L],葡萄糖可调节 MDSCs-IPCs 胰岛素的分泌.结论 MDSCs易于分离培养、增殖能力强,体外可诱导分化为有功能的IPCs,适合作为再生医学的种子细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓玲	内蒙古自治区人民医院临床医学研究中心	28	99	5.0	9.0
2	任宇	内蒙古自治区人民医院临床医学研究中心	12	14	2.0	2.0
3	梁红宇	内蒙古自治区人民医院临床医学研究中心	4	3	1.0	1.0
4	楠吉桑漠	内蒙古自治区人民医院临床医学研究中心	5	5	2.0	2.0